Дослідженні експресії білків E-кадгерину та β-катеніну у плоскоклітинному раку слизової оболонки порожнини рота.
- 1. Тема: Дослідити епітеліально-мезенхіміальний перехід та його зв'язок з пухлинними клітинами, які експресують маркерні білки епітеліальних стовбурових клітин при прогресії раку ротової порожнини. Назва етапу: Дослідити експресію маркерних білків епітеліально- мезенхімального переходу у букальному епітелію та у пухлині у хворих на плоскоклітинний рак та у осіб з групи ризику. Мета роботи: Дослідженні експресії білків E-кадгерину та β-катеніну у плоскоклітинному раку слизової оболонки порожнини рота.
- 2. Матеріал для дослідження Зразки операційного матеріалу (гістологічні парафінові блоки) 20 пацієнтів, хворих на рак слизової порожнини рота ІІ-ІІІ стадій, які не отримували спеціального лікування до операції (хіміотерапії та променевої терапії). Методи дослідження: - морфологічний, - імуногістохімічний (імуногістохімічне визначення експресії маркерних білків: бета-катеніну, Е-кадгерину, Кі-67). Кількість позитивно забарвлених клітин визначали у відсотках – індекс мітки (ІМ, %). При значеннях ІМ < за медіану (Ме), експресію відповідного маркера вважали низькою, а при ІМ ≥ Ме – високою. - статистичні методи.
- 3. Епітеліально-мезенхіміальний перехід - це процес, при якому епітеліальні клітини втрачають притаманні їм властивості (міжклітинну адгезію і апікально-базальну полярність) і набувають властивості мезенхіміальних клітин (веретеновидна форма, рухливість і синтез компонентів позаклітинного матриксу). ЕМП може лежати в основі розвитку і прогресії багатьох патологічних процесів і відображає адаптивні зміни в клітинах у відповідь на пошкодження або зміну активності генів при пухлинному рості. Вивчення молекулярних механізмів ЕМП відкриває можливості розвитку таргетної терапії пухлинного захворювання, індивідуальної оцінки ризику його розвитку.
- 4. Результати E-катгерин і β-катенін є білками адгезії і релокалізація білка β-катеніну із цитоплазми в ядро призводить до порушення його зв'язку з E-катгерином, в результаті чого може відбуватися руйнування міжклітинної адгезії, нами було проаналізована експресія E-катгерину у пухлинах з низькою (ІМ < Ме) та високою (ІМ ≥ Ме) ядерною експресією β-катеніну. Група з високою експресією бета-катеніну - 50% дослідженого матеріалу.
- 5. Рис.1 Експресія білка Е-катгерину у пухлинних клітинах слизової порожнини рота. Імуногістохімічний метод, дофарбовано гематоксиліном Майєра. 1 - х1000; 2 - х400; 3 - х100.
- 6. Рис.2. Експресія білку β-катеніну у пухлинних клітинах слизової порожнини рота. Імуногістохімічний метод, дофарбовано гематоксиліном Майєра. 1- х100; 2- х400; 3 - х1000.
- 7. 30,2+ 2,366,8+ 6,474,3+ 56,3+ 1,5Г р у п а з н и з ь к о ю експресією β-катеніну ядерного (n-9) 43,2+ 3,563,8+ 5,169,8+ 3,910,6+ 2,8Група з високою експресією β-катеніну ядерного (n=11) Кі-67Е-кадгері ну β -катеніну цитоплазма т β-катеніну ядерного Показники експресії маркерних білків (ІМ, %)Групи досліджуваних блоків Показники експресії маркерних білків гістологічних блоків пухлин пацієнтів, хворих на рак слизової порожнини рота.
- 8. Рис.1 Медіани експресії маркерних білків у досліджуваних групах (синій - група з високим рівнем експресії ядерного, червоний - група з низькою експресією ядерного кадгерину). 1. медіана β-катеніну ядерного, 2. медіана β -катеніну цитоплазматичного, 3. медіана Е-кадгеріну, 4. медіана Кі-67 1 2 3 4 0 10 20 30 40 50 60 70 80
- 9. 3161667,5Медіана 5359502525811 435070201176 (77) 45,340603011488 Кі-67Е-кадгерінуβ -катеніну цитоплазматичного β-катеніну ядерного Показники (ІМ) експресії маркерних білків (%)Гістологічні блоки пацієнтів Таблиця 2. Показники експресії маркерних білків з високим рівнем експресії β-катеніну ядерного.
- 10. ВИСНОВКИ: Встановлено гетерогенність клітинної популяції за експресією та локалізацією білків адгезії E-катгерину і β-катеніну. Показано, що пухлини з високою ядерною експресією β-катеніну характеризуються низькою експресією E-катгери- ну, високою проліферативною активністю, що асоціюється з процесом епітеліально-мезенхімального переходу.