3. Ciljano sustav za primjenu lijeka je poseban oblik sustava za primjenu
lijeka, gdje je terapijsko sredstvo selektivno usmjerena ili dostaviti samo
na svom mjestu djelovanja ili apsorpcije, a ne na ne-ciljnim organima ili
tkivima ili Stanice,
Izvor: https: //www.dalton.com/conjugation
4. Ciljanje na asialoglycoprotein receptor (ASGP-R) je najvi邸e univerzalno koristiti metoda koja se
koristi kao ciljni receptor za primjenu lijeka u hepatocitima,
Izvor: https: //www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168365915002345
7. Orosomucoid priprema
Svje転e humani serum (oko 1,2 L) je prijenosed za cijev za dijalizu i usljed dijalized preko noi na 4 protiv 20 litara 0,05 M natrijevog
acetata, pH 4.5.
dializiran plazma je centrifugad na 14000 rpm tijekom 10 minuta pri 4 .
Pellet je odbaena i supernatant je filtared kroz 0.45u filter.
Dijalizira i filtrira serum je pro邸lo kroz stupac DEAE-celuloze, kolona ispere s 0,05 M NaAc pH 4.5 dok eluat imao absorbanciju pri 280
nm, manja od 0,10, Kolona se zatim ispere s 0,1 M NaAc pH 4 do apsorpcije ispiranje, manji od 0.1,
Orosomucoid eluat e dovesti do 50% zasienja s amonijum sulfat. dopustiti to je da se mije邸a preko noi na 4 .
Centrifugiranjem pri 14000 rpm, 15 minuta, 4 stupnjeva. i supernatanta su uzete.
Prema supernatant je dodatied polako Krutina amonij-sulfat da se dovesti otopine na 92% zasienja,
Centrifugi na 14000 rpm tijekom 30 minuta na 4 . Odvoji se supernatant.
Pellet se sprema i otopitid u minimalna koliina vode i prenese u cijev za dijalizu, usljed dijalized to protiv 20 L vode za 2 dana pri 4 .
Pohranjeni na -20 ,
8. Asialoorosomucoid (AsOR) - brz desialyation
od glikoproteini
Izolirani ili otopi u vodi.
Isti volumen 0,1 N H2S04 se dodaje OR otopina.
Smjesa zagrijava na 80 tijekom 1 h u voda.
smjesa acidolizom je uklonjena iz vodene kupelji, neutralizirana s NaOH.
Dijalizira nasuprot vodi s 2 promjenama roku od 48 sati, i zatim se liofilizira.
Provjerite uinkovitost desialyation Warren testa
9. Postupak: EDC Reakcija se dobije
PL (Poli-L-lizina)
1. uravnote転e EDC do sobne temperature.
2. Priprema:
2 mg AsOR u 200 konjugacije puferu (MES 0.1 M, PH4.5).
Do 2 mg PL u 500 ul konjugacije pufera.
3. Izmije邸ati dva rje邸enja.
4. Otopiti 10 mg EDC u 1 ml naji邸om vodom i odmah dodati 100 ul na nosa
peptid rije邸enje.
5. Rad tijekom 2 sata na sobnoj temperaturi.
6, Proi邸avanje konjugata pomou desalinizirajue kolone.
7. U sluaju da se za pohranjivanje vi邸e od nekoliko dana, sterilni filter konjugata i ouvati u
sterilnu posudu na 4 属 C ili 20 属 C.
11. Ribavirin monofosfat konjugacija do AsOR
Za kemijsku vezanje na RMP AsOR je kori邸ten EDC!
1 mM RMP se obrauje s 0,1 M EDC u 0.5 M MES pufer pH 6.0.
Je zatim 0,01 mM AsOR u ukupnom volumenu od 2 ml.
Smjesa AsOR-RMP reagira na 25 jedan dan.
Konana reakcijska smjesa je proi邸ena dijalizom kroz membranu sa 12-14
k da nasuprot 4 litre destilirane vode i hladnog sa 6 do 10 razmjene.
kvantitativnog odreivanja prinosa konjugacije je procijenjena promjene
smjene AsOR i AsOR-RMP konjugata na denaturiranju SDS stranica
elektroforeza