Laporan
Download as DOCX, PDF
0 likes2,473 views
Laporan praktikum ini membahas identifikasi dan penetapan kadar sianokobalaminn (vitamin B12) menggunakan spektrofotometer UV-Visible. Vitamin B12 memiliki serapan maksimal pada panjang gelombang 278 nm, 361 nm, dan 550 nm. Hasil pengukuran menunjukkan perbedaan serapan relatif dengan referensi karena sampel bukan vitamin B12 murni.
Laporan
- 1. LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ANALISIS INSTRUMEN IdentifikasidanPenetapan Kadar InjeksiSianokobalamindenganSpektrofotometer UV-Visible NAMA : KHILDA FITHRI ARYANI NIM : 1110096000050 SEMESTER/KELAS: 6/B PROGRAM STUDI KIMIA FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 2013 M/ 1434
- 2. A. PENDAHULUAN Salah satujenisspektrofotometer yang seringdigunakandalamkegiatananalisaadalahspektrofotometer UV-Visible.Panjanggelombang yang secaramaksimaldiabsorbsiditentukandenganmengukurabsorbansisampelpadarentangpanjanggelomban g yang telahditentukan.Setelahcahayamelewatilarutanuji, energicahaya yang strike phototube dinyatakansebagai ratio transmitansicahayaIT (cahaya yang melewatisampel) terhadapcahaya incident I0 (intensitascahayadarisumbersebelummelewatisampel). Cahaya yang diterima phototube adalahdiukursebagaipersentransmitansi (%T) atausebagai log kebalikannya, absorbansi (A). Dalampengukurankadarsuatusenyawadapatdilakukandenganmembandingkanhargaserapanrelat ifnya. Serapan relative adalahperbandinganhargaserapanpada 2 ujungpanjanggelombangtertentu yang untukzattertentubesarnyatertentu pula sehinggadigunakanuntukmengidentifikasizattersebut. Untuklarutanberwarnasebenarnyamasihdapatdiukurdengan colorimeter yang harganyalebihmurahdibandingkandengan UV-Vis. Akan tetapi, kemampuan UV-Vis lebihluasyaitumengukurlangsunglarutanberwarnamaupunlarutan yang tidakberwarna.Sebelummelakukananalisa, beberapahal yang harusdiperhatikanpadapengukuranabsorbansiantaralain : 1. Alatharusdikalibrasidenganbaik 2. Hargaabsorbansi (A) yang digunakanuntukperbandinganadalah yang diperolehdarialat yang dugunakan. Dengancarainikeunggulan yang kitadapatkanadalahcepatdantidakperlubakupembanding. Vitamin B12 bersifat unik diantara semua vitamin lainnya, yaitu molekulnya tidak hanya mengandung suatu molekul organik yang kompleks, tetapi juga mengandung unsur mikro yang esensial yaitu kobalt (Co). Vitamin B12 disebut juga sianokobalamin sebab molekulnya mengandung gugus amino yang berikatan dengan kobalt, kompleks terkoordinasi serupa dengan sistem cincin porfinin pada heme dan protein heme pada bentuk koenzim vitamin B12 yang disebut 5 desksiadenosilkobalamin, gugus siono digantikan oleh gugus S;deoksiadenosil. Bentuk lain dari koenzim B12 adalah metilkobalamin. Vitamin B12 merupakan vitamin yang memiliki struktur kimia paling komplek dibandingkan dengan vitamin lainnya. Vitamin B12 tidak dibuat oleh tumbuhan atau hewan, tetapi dapat dijumpai pada hewan dan mikroorganisme. Vitamin B12 ini hanya dapat disintesis oleh mikroorganisme 50% vitamin B12 pada orang dewasa dihasilkan oleh bakteri usus. Menurut H.A Baker, vitamin B12 merupakan bagian dari koenzim B12, dengan struktur sebagai berikut :
- 3. Vitamin B12 disebut juga antipernisim anemia, karena pertama kali diketemukan sebagai senyawa yang dapat mengobati penyakit anemia permisiosa, yaitu pembentukan sel-sel darah merah tidak dewasa dan rapuh, vitamin B12 dikenal sebagai faktor pertumbuhan beberapa bakteri dan protozoa. B. TUJUAN 1. Memahamiprinsipidentifikasidanpenetapankadarsianokobalaminmelaluimetodespektrofotomet ri UV-Vis. 2. Menentukankadarsianokobalamindenganalatspektrofotometer UV-Vis. C. METODOLOGI 1. Bahan-bahan Sianokobalamin (vitamin B12) kemasanampul 500 ug/ml, aquadest. 2. Alat-alat Mortar,tabungreaksi, raktabungreaksi, vortex, corong, kertassaring,tisu, Spektrofotometer UV- Vis.
- 4. 3. ProsedurKerja Dikeluarkanisidariampulinjeksisianokobalamin (vitamin B12) dandimasukkankedalam beaker glass 50 mL dandilarutkandengan 10 mL aquadest.Disaringkemudiandiukurserapanpadakuvetsetebal 1 cm padapanjanggelombang 550 nm, 361 nm, dan 278 nm. Dihitungperbandinganserapanpada : a. 361 nm / 550 nm b. 361 nm / 278 nm Dihitungkadar vitamin B12 ( C63H88CoN14P) D. HASIL DAN PEMBAHASAN Absorbansipada 了 NamaSampel 550 nm 361 nm 278 nm Fatigon 1.2583 0.0343 6.0000 IPI 0.0851 0.1061 0.6476 竜untuk vitamin B12 = 0.02 Dari data di atasdidapatkanperbandinganserapansebagaiberikut : Fatigon : a. 361 nm / 550 nm = 0,0343 / 1,2583 = 0,02725 A = 竜.L.C C= = b. 361 nm / 278 nm = 0,0343 / 6,000 = 0,00572 A = 竜.L.C
- 5. C= = IPI : a. 361 nm / 550 nm = 0,1061 / 0,0851 = 1,24676 A = 竜.L.C C= = b. 361 nm / 278 nm = 0,1061 / 0,6476 = 0,16383 A = 竜.L.C C= = Padapercobaanpenentuankadar vitamin B12 denganspektrofotometer UV-Vis inidilakukanpengujianabsorbansiterhadaplarutandenganpanjanggelombang yang bervariasi, karena vitamin B12 dapatdiujidenganpanjanggelombang 278, 361, dan 550. Sampel vitamin B12 yang kami gunakanadalahobat yang mengandung vitamin B12 yang cukuptinggi, obattersebutberbentuk tablet sehinggaperludilakukanpenghalusanataupenggerusansampeldenganmenggunakan mortar.Setelahhalus, serbukdilarutkandengan 10 ml aquadesdandihomogenkandengan vortex. Proses iniberjalancukupcepatkarena vitamin B12 merupakanjenis vitamin yang larutdalam air. Namun, karenavariasikomposisidarisampel, homogenisasiinitidakterjadidenganbaik, ataudengan kata lain terdapatendapanputihpadalarutanmerahmudanyasehinggaperludilakukanpenyaringan agar larutanbersifatbeningdantidakberkoloid. Hal inijugamenjadipengaruhpentingpadapembacaanserapannyapadaalatSpektrofotometerUv-Vis. Padapengukuranserapaninidilakukantigapanjanggelombangseperti yang tertulis di atas, halinidisebabkanolehStandar Vitamin B12 murni yang memilikiserapantinggipadaketigapanjanggelombangtersebutsebagaimanatercantumdalamFarmakope. Hasil yang didapatkanpadapercobaaninidenganperbandingan 361 nm : 550 nm padasampelfatigonabsorbansi yang didapatkan 0,02725 danpadasampel IPI 1,24676
- 6. danhasilreferensiserapan relative ataunilaiabsorbansidenganberdasarkanreferensifarmakope Indonesia dari Vitamin B12 adalah ( 3,15 3,45 ) yang dapatdiketahuibahwanilaitersebutatau data yang didapatkanmasihjauhdarihasilreferensi yang didapatkan. Dan hasildaripanjanggelombang 361 nm : 278 nm padasampelFatigonhasil yang didapatkansebesar 0,00572 sedangkanpadasampel IPI sebesar 0,16383. Berdasarkanreferensiserapanrelatifnyasebesar( 1,75 1,98 ) sehinggapadapanjanggelombangtersebutserapanrelaifnyamasihbelummaksimalataumasihjauhdarirefer ensi yang didapatkan.Dari hasilpengukuran, didapatkannilaiabsorbansi yang cenderungtidakstabil,inimenunjukkanbahwasampel yang diujikanbukan vitamin B12 murni, melainkanmemilikikomposisi yang bervariasiataumengandungzat-zatlain, karenapadadasarnyametodepengujianinidikhususkanuntuksampelujimurni. Kesimpulan 1. Vitamin B12 adalahsalahsatujenis vitamin yang larutdalam air danmerupakanbagiandari vitamin B complex yang mengandungkobalt, sehinggadisebutsebagaisianocobalamin. 2. Vitamin B12 memilikidaerahserapanbaikpada 3 panjanggelombang, yaitu 278 nm, 361 nm, dan 550 nm. 3. Dari hasilpengamatan yang dilakukanterjadiperbedaanserapan relative atauabsorbansidenganreferensi yang didapatkan.Karenasampel yang digunakanbukan vitamin B12 murni. DaftarPustaka R.A. Day,JR and Underwood,1986, Analisis Kimia Kuantitatif, Erlangga, Jakarta Pavia L. Donald, et al. 1995, Introduction to Organic Laboratory Techniques, Saunders Collage,USA. Skoog, D.A. 1996. Foundamental of Analytical Chemistry, &edSauders Collage Publishing Willerd, H.H et al. 1998. Instrumental Methods of Analysis, Wadsworth.