4. 1. Pewarnaan KOH
Reagent yang digunakan
1. KOH 10 %
2. Tinta Parker ( warna blue black )
Cara Kerja
1. 1 tetes KOH 10 % diatas object glass
2. Ambil sampel,campur dengan KOH 10 %
3. Tambahkan 1 tetes tinta Parker
4. Tutup dengan deck glass
5. Panaskan beberapa saat diatas nyala api
6. Sediaan siap diperiksa dibawah mikroskop
5. 2. Pewarnaan Lacto Phenol Cotton Blue (
LCB )
Reagent
1. Phenol ( 20 gram )
2. Lactic acid ( 20 ml )
3. Glycerol ( 40 gram )
4. Cotton blue ( 0,05 gram )
Cara Kerja
1. Ambil cat LCB diatas object glass
2. Tambahkan sampel,campur
3. Tutup dengan deck glass
4. Periksa dibawah mikroskop
10. ISOLASI
Isolasi Jamur
1. Isolasi dari bahan pangan padat
2. Isolasi fungi dari biji bijian
3. Isolasi fungi endofit
4. Isolasi kapang dari substrat cair
5. Isolasi kapang dari udara
Isolasi Khamir
1. Isolasi dan pemurnian khamir dari buah
2. Isolasi dan pemurnian khamir dari bunga
3. Isolasi dan pemurnian khamir dari air
12. 1. Cara isolasi umum kapang dari
bahan pangan padat
Langkah langkah :
1. Makanan yang berjamur diambil 賊 5 gram
dihaluskan,masukkan pada erlenmeyer / tabung
reaksi
2. Tambahkan larutan garam fisiologi 0,8% /
aquadest steril
3. Lakukan penanaman pada media yang sesuai dengan
metode gores
4. Inkubasi pada 28 30 尊C selama 2 3 hari
5. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan
13. 2. Isolasi fungi dari biji - bijian
1. Biji dicuci dengan air keran,alkohol 70 % ( 2
menit ),air aquadest kemudian keringkan
2. Letakkan biji pada median,inkubasi pada suhu 28
30 尊C selama 2 4 hari ( sudah berjamur )
3. Ambil biji yang sudah berjamur masukkan pada
erlenmeyer yang berisi aquadest steril,kocok
selama 1 menit
4. Kemudian tanam pada media yang sesuai dengan
metode gores atau dengan meneteskan 1 tetes
diatas media
5. Inkubasi 1 2 hari pada suhu 28 30 尊C
6. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan
14. 3. Isolasi fungi endofit
1. Potong bagian tumbuhan < 1 cm,cuci dengan air
mengalir ( 10 mnt ),rendam pada alkohol 75 % ( 2
menit ),keringkan
2. Kemudian potong tipis dan letakkan diatas
permukaan media yang sesuai kemudian diinkubasi
3. Potongan yang sudah berjamur masukkan pada
erlenmeyer berisi aquadest steril,kocok dan
tanam dengan metode gores
4. Inkubasi 2 7 hari
5. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan
15. 4. Isolasi kapang dari substrat cair
Sampel yang berupa cairan ( sirup,air
laut,saliva,cairan vagina ) dapat
langsung ditanam pada media yang
sesuai.Inkubasi pada suhu yang sesuai.
16. 5. Isolasi kapang dari udara
1. Media yang sesuai dibiarkan tanpa
tutup selama 15 20 menit ditempat
fungi akan diperiksa
2. Tutup dan inkubasi pada suhu yang
sesuai
3. Ambil 1 koloni untuk dimurnikan
18. 1. Isolasi dan pemurnian khamir
dari buah
1. Usapkan jarum ohse pada permukaan /
daging buah kemudian goreskan pada
media YMA
2. Inkubasi pada suhu yang sesuai
19. 2. Isolasi dan pemurnian khamir
dan bunga
1. Ambil pada bagian madu bunga dengan
jarum ohse kemudian goreskan pada
media YMA
2. Inkubasi pada suhu yang sesuai
20. 3. Isolasi dan pemurnian khamir
dari air
1. Sampel air disaring dengan filter
membran Milipor berpori 0,45 mm
2. Kemudian filter membran diletakkan
pada media YMA dan inkubasi pada
suhu yang sesuai
3. Jika sampel berasal dari air laut maka
pada media YMA ditambahkan NaCl 1,5
4%