ݺߣ

ݺߣShare a Scribd company logo

NGHIÊN CỨU VAI TRÒ CỦA VI KHUẨN KỴ KHÍ CLOSTRIDIUM DIFFICILE TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM

•
•
T
taimienphi

Dowload: http://adf.ly/1SFlkt NGHIÊN CỨU VAI TRÒ CỦA VI KHUẨN KỴ KHÍ CLOSTRIDIUM DIFFICILE TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM

1 of 32
NGHIÊN C U VAI TRÒ C A VI KHU N KỨ Ủ Ẩ Ỵ KHÍ CLOSTRIDIUM DIFFICILE T I M T SẠ Ộ Ố B NH VI N MI N B C VI T NAMỆ Ệ Ở Ề Ắ Ệ Vũ Th Thu H ngị ườ Khoa Vi khu nẩ Vi n V sinh D ch t Trung ngệ ệ ị ễ ươ
Gi I THI U CHUNGỚ Ệ • Clostridium difficile (C. difficile), trực khuẩn Gram dương, kỵ khí tuyệt đối • Căn nguyên vi khuẩn quan trọng nhất gây tiêu chảy sau dùng kháng sinh • Bệnh cảnh lâm sàng dao động từ nhẹ→nặng và tử vong 2 Hình ảnh viêm ĐT giả mạc do C. difficile
Phơi nhiễm với C. difficile CDI Mất cân bằng hệ VK chí đường ruột Cơ địa (tuổi cao, bệnh lý nền kèm theo…) Người lành mang trùng Không mang VK Sinh bệnh học gồm 3 yếu tố Johnson, S, and Gerding DN. Clin Infect Dis 1998 26:1027-1034 Hệ vi khuẩn chí bình thường 1 2 3
Hệ vi khuẩn chí bình thường trong ruột Liệu pháp kháng sinh Phá vỡ sự cân bằng Tiêu chảy/ Viêm ĐT giả mạc liên quan kháng sinh Tăng sinh quá mức VK sinh độc tố Tăng sinh quá mức VK sinh độc tố
T l tái h i nhi m trùng doỷ ệ ồ ễ Clostridium difficile gây khó khăn cho đi u trề ị Tái nhiễm Tái phát Tái phát: Đợt bệnh xảy ra trong vòng 2 tháng sau khi điều trị khỏi đợt bệnh thứ 1
 C. difficile gây ra các vụ dịch tiêu chảy trong bệnh viện và cộng đồng.  3 triệu ca mới nhiễm C. difficile liên quan tới tiêu chảy tại Mỹ hàng năm, trong đó có14 000 ca tử vong  Người và động vật nuôi (lợn, gà) cùng là vật chủ mang vi khuẩn C. difficile trong đường ruột→sự lây truyền C. difficile từ lợn sang người??? D ch t h cị ễ ọ Các quốc gia có nhiễm trùng do Clostridium difficile típ chủng ribotype 027 Clements, ACA et al. Lancet Infect Dis 2010; 10:395-04.
Clostridium difficile là trực khuẩn gram dương kỵ khí tuyệt đối sinh nha bào Tôi có th s ng sótể ố trong môi tr ng b nh vi n.ườ ệ ệ nha bào c a tôiủ không b tiêu di tị ệ b i c n sát khu nở ồ ẩ Vi khu n h cẩ ọ
Đ c t A và B đóng vai trò quan tr ng trong quá trình sinhộ ố ọ b nh h c c a nhi m trùng doệ ọ ủ ễ Clostridium difficile Toxin A-positive Toxin B-positive A+ B+ Toxin A-negative Toxin B-positive A- B+ Toxin A-negative Toxin B-negative A- B- Actin-specific ADP-ribosyltransferase (Binary toxin, CDT)
S c n thi t ti n hành nghiên c uự ầ ế ế ứ • Gần đây, nhiễm trùng do C. difficile xuất hiện thường xuyên, nặng nề hơn, khó đáp ứng điều trị và dễ tái phát. • Tỷ lệ mắc bệnh gia tăng gấp 2 lần so với giai đoạn 1996-2003 (McDonald et al Emerg Infect Dis 2006) • Chủng vi khuẩn gây bệnh mới xuất hiện có độc lực cao hơn do có biến đổi kiểu gen (đột biến mất đoạn ở gen sinh độc tố) hoặc xuất hiện thêm gen gắn độc tố và thường kháng kháng sinh dòng quinolon (Barbut et al Clin Microbiol Infect 2007) 9
 Ở châu Á: C. difficile là tác nhân truyền nhiễm mới nổi của các nước Nhật Bản, Trung quốc, Singapore, Hàn Quốc và Thái Lan.  Ở Việt Nam: yếu tố gợi ý C. difficile là tác nhân vi khuẩn quan trọng bao gồm:  Thực trạng lạm dụng kháng sinh tại bệnh viện và cộng đồng cho người và động vật  Quá tải tại bệnh viện và kiểm soát nhiễm khuẩn bệnh viện kém hiệu quả  Sự phát triển rộng rãi của ngành công nghiệp chăn nuôi lợn Tuy nhiên, nghiên cứu về C. difficile chưa được chú ý quan tâm ở Việt Nam.
M c tiêu nghiên c uụ ứ 1. Tìm hi u vai trò c a vi khu n C. difficile trên các qu n thể ủ ẩ ầ ể ng i và l n nuôiườ ợ 2. Xác đ nh đ c đi m sinh h c phân t c a ch ng vi khu n C.ị ặ ể ọ ử ủ ủ ẩ difficile gây b nh phân l p t b nh nhân m t s b nh vi nệ ậ ừ ệ ở ộ ố ệ ệ mi n B c Vi t Namở ề ắ ệ
• Thiết kế nghiên cứu: mô tả cắt ngang • Địa điểm và thời gian nghiên cứu: • Hà Nội: 300 ca tiêu chảy người lớn, 4 bệnh viện , 03 năm, từ tháng 3/2013 đến 3/2016 • Nam Định: 638 ca tiêu chảy trẻ em, bệnh viện tỉnh Nam Định, từ 1/2013-1/2014 • Hà Nam: 94 mẫu phân chuồng lợn nuôi, Duy Tiên, Hà Nam, tháng 8/2015 Ph ng pháp nghiên c uươ ứ
Viện VSDTTW BV Bạch Mai BV Bệnh nhiệt đới TƯ BV Đống ĐaBV Lão Khoa Khoa Lây/ ĐTTC ĐTTC HSCC Khoa Lây/ ĐTTC Bệnh nhân tiêu chảy sau dung kháng sinh M ng l i b nh vi n nghiên c u vạ ướ ệ ệ ứ ề C. difficile t i Hà N iạ ộ
Tr l i k tả ờ ế quả Sàng l cọ Qui trình nghiên c uứ
K thu t xét nghi m s d ng cho nghiên c uỹ ậ ệ ử ụ ứ • C y m u phân cho phân l p vi khu n k khí C. difficileấ ẫ ậ ẩ ị • Phát hi n đ c t A và B c a vi khu n gây b nh b ng ph ngệ ộ ố ủ ẩ ệ ằ ươ pháp PCR • Kĩ thu t phân lo i các ch ng vi khu n C. difficile m c đậ ạ ủ ẩ ở ứ ộ phân tử: kĩ thu t ribotyping, và gi i trình t genậ ả ự slpA 15
1. Nuôi cấy phân tìm vi khuẩn gây bệnh Chuyển 0,1 ml phân đã xử lý lên CCMA, tán đều
Ủ kỵ khí các đĩa nuôi cấy sử dụng bình ủ hoặc túi ủ kỵ khí , đọc kết quả sau 48h Túi ủ kỵ khí Bình ủ kỵ khí Khí trường 80% N2, 10% C02 và 10% H2
Định danh vi khuẩn gây bệnh Định danh sơ bộ : 　 hình thái khuẩn lạc trên môi trường nuôi cấy và hình thể vi khuẩn bằng phương pháp nhuộm Gram. Định danh xác định: bằng bộ sinh phẩm sinh hóa API 20A (Biomerieux, Pháp) và ngưng kết với kháng huyết thanh đặc hiệu của vi khuẩn (Nissui, Nhật Bản).
2. Xác định độc tố vi khuẩn: bằng 2 phương pháp • Vi khuẩn đã phân lập nuôi cấy qua đêm trong canh thang thịt chín, canh khuẩn sử dụng trực tiếp cho thử nghiệm sinh độc tố bằng bộ kit ImmunoCard Toxins A&B (Nissui, Nhật Bản). • Phát hiện gen sinh độc tố A và B bằng phương pháp PCR đơn mồi 300bp→ 200bp→ M 1 2 3 M 1 2 3 Tcd A Tcd B
3. Kĩ thu t phân lo i các ch ng vi khu n m c đ phân tậ ạ ủ ẩ ở ứ ộ ử: kĩ thu tậ ribotyping, PFGE và gi i trình t genả ự
Bệnh viện Số mẫu xét nghiệm Số mẫu nuôi cấy dương tính với C. difficile Độc tố B positive B negative Bạch Mai 193 49 35 14 Bệnh Nhiệt đới TƯ 72 16 10 6 Lão Khoa 40 10 8 2 Đống Đa 53 16 10 6 Tổng số 358 91 63 28 1. Nhiễm trùng do C. difficile chiếm tỉ lệ đáng kể ở người lớn bị tiêu chảy sau dung kháng sinh ở Hà Nội (17,6%) 2. Tỉ lệ phân lập vi khuẩn C. difficile trong bệnh nhân bị tiêu chảy sau dung kháng sinh là 25,4% K t qu 1.ế ả Nhi m trùng do C. difficile t i 4 b nh vi n Hà N iễ ạ ệ ệ ở ộ
Típ đ c t c a ch ng C. difficile gây b nhộ ố ủ ủ ệ t i m t s b nh vi n Hà N iạ ộ ố ệ ệ ở ộ Toxin genotype N % C. difficile genotype A+B+ 35 35.7 C. difficile genotype A-B+ 30 30.6 C. difficile genotype A-B- 33 33.7 T ng sổ ố 98 100.0 Không phát hiện chủng C. difficile mang đ c t kép cdtA/cdtBộ ố
Molecular Typing results of toxigenic Clostridium difficile strains recovered from CDI cases at 4 hospital for in Hanoi, Vietnam • Típ ribotype thường gặp trong số các chủng C. difficile gây bệnh là 017, trf, og39 và cc835. • Kiểu trình tự slpA (slpA ST) thường gặp tương ứng là fr-01, og39-01 và kr- 03.1 Típ đ c tộ ố PCR ribotype slpA ST S ch ng phân l p theo b nhố ủ ậ ệ vi nệ T ng s ch ngổ ố ủ (%) Lão Khoa B nhệ nhi t đ iệ ớ Bach Mai Dong Da A+B+CDT- cr cr-01 1 1 (2.0) 001 gr-01 2 2 (4.1) okz gr-02 1 1 (2.0) cc835 kr-03.1 4 5 9 (18.4) 0g39 og39-01 2 2 5 2 11 (22.4) A-B+CDT- 017 fr-01 2 4 4 3 13 (26.5) trf fr-01 1 3 9 13 (24.5) T ng sổ ố 6 9 25 10 50
S phân b các típ d ch t h c phân t c a ch ngự ố ị ễ ọ ử ủ ủ C. difficile theo không gian và th i gianờ 012345678 Clinicalward 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 Months 17 trf og39 cc845 001 cr okz 2012 20142013 2015 Típ ribotype trf - slpA ST fr-01 có xu hướng xuất hiện nổi trội trong khoảng thời gian gần đây, gợi ý khả năng hình thành chùm ca bệnh trong bệnh viện trong cùng thời điểm nhất định.
Chùm ca b nh liên quan đ n ch ng C. difficileệ ế ủ ribotype trf - slpA ST fr-01 phát hi n t i Khoa Lây, b nh vi n B ch Mai năm 2014ệ ạ ệ ệ ạ PCR ribotyping định típ chủng vi khuẩn Clostridium difficile dựa trên phân tích đa hình. M; thang ADN chuẩn, 1, 3-6: chủng vi khuẩn Clostridium difficile A-B+ phân lập từ bệnh nhân khác, 2; chủng vi khuẩn Clostridium difficile A-B+ phân lập từ bệnh nhân Nguyễn Thị N, 7: chứng dương Clostridium difficile A-B+ ribotype 017 8: chứng dương Clostridium difficile A-B+ ribotype trf
a. JND14-01 (okz) b. JND14-05 (og39) c. JND14-09 (og39) d. JND14-19 (cc835) e. JND14-23 (og39) f. JND14-24 (001) g. JND14-25 (cc835) h. JND14-26 (cc835) i. JND14-27 (og39) j. JND14-28 (og39) k. JND14-31 (cc835) l. JND14-34 (cc835) m. JND14-37 (cc835) 1. 001 2. 002 3. 014 4. smz PCR ribotyping pattern <A+ B+ CDT- > a a b c d e f g h i j k l m 1 2 3 4
a. JND14-03 (017) b. JND14-07 (017) c. JND14-08 (017) d. JND14-10 (017) e. JND14-12 (trf) f. JND14-17 (017) g. JND14-18 (017) h. JND14-20 (017) i. JND14-30 (017) j. JND14-32 (017) k. JND14-35 (017) 1. 017 2. trf PCR ribotyping pattern <A- B+ CDT- > a b c d e f g h i j k 1 2
1. Detection rate of toxigenic Clostridium difficile among children with diarrhea ranged from 6.0 % to 9.3% 2. C. difficile A ＋ B+ strains 　 was more common in Nam Dinh (Northern Vietnam), whereas C. difficile A-B+ was more frequent in Dong Nai (Southern Vietnam) (P<0.0001). T l phát hi nỉ ệ ệ C. difficile tr b tiêu ch y và ng i kh e m nhở ẻ ị ả ườ ỏ ạ N s d ngtính(%)ố ươ N s d ngtính(%)ố ươ N s d ngtính(%)ố ươ Clostridiumdifficile 913 144(15.8) 430 82(19.1) 180 18(10) ToxigenicClostridiumdifficile 913 55(6.0) 430 40(9.3) 180 11(6.1) Clostridiumdifficile genotypingA+B+ 144 41(28.5) 82 13(15.9) 18 8(44.4) Clostridiumdifficile genotypingA-B+ 144 14(9.7) 82 27(32.9) 18 3(16.7) Clostridiumdifficile genotypingA-B- 144 89(61.8) 82 42(51.2) 18 7(38.9) Tr tiêuch y NamĐnhẻ ả ở ị Tr tiêuch y Đ ngNaiẻ ả ở ồng ikh em nh NamĐnườ ỏ ạ ở ị
K t lu nế ậ 1. A significant proportion of Clostridium difficile infection was reported among adult population with antibiotics-associated diarrhea in some major hospitals in Hanoi, Vietnam. 2. The most predominant PCR ribotype found among C. difficile isolates in Vietnam were PCR ribotype 017, Og39 and cc835
Recommendations 1. A good system for laboratory diagnosis of Clostridium difficile infection should be established in clinical laboratories in Vietnamese hospitals 2. Monitoring of the prevalence and molecular epidemiology of Clostridium difficile infection in Vietnam is needed to identify and control epidemics of Clostridium difficile infection
L i c m nờ ả ơ
Chúng tôi trân tr ng c m n s ng họ ả ơ ự ủ ộ và đóng góp ý ki n c a các Th y/ Côế ủ ầ

More Related Content

NGHIÊN CỨU VAI TRÒ CỦA VI KHUẨN KỴ KHÍ CLOSTRIDIUM DIFFICILE TẠI MỘT SỐ BỆNH VIỆN Ở MIỀN BẮC VIỆT NAM

  • 1. NGHIÊN C U VAI TRÒ C A VI KHU N KỨ Ủ Ẩ Ỵ KHÍ CLOSTRIDIUM DIFFICILE T I M T SẠ Ộ Ố B NH VI N MI N B C VI T NAMỆ Ệ Ở Ề Ắ Ệ Vũ Th Thu H ngị ườ Khoa Vi khu nẩ Vi n V sinh D ch t Trung ngệ ệ ị ễ ươ
  • 2. Gi I THI U CHUNGỚ Ệ • Clostridium difficile (C. difficile), trực khuẩn Gram dương, kỵ khí tuyệt đối • Căn nguyên vi khuẩn quan trọng nhất gây tiêu chảy sau dùng kháng sinh • Bệnh cảnh lâm sàng dao động từ nhẹ→nặng và tử vong 2 Hình ảnh viêm ĐT giả mạc do C. difficile
  • 3. Phơi nhiễm với C. difficile CDI Mất cân bằng hệ VK chí đường ruột Cơ địa (tuổi cao, bệnh lý nền kèm theo…) Người lành mang trùng Không mang VK Sinh bệnh học gồm 3 yếu tố Johnson, S, and Gerding DN. Clin Infect Dis 1998 26:1027-1034 Hệ vi khuẩn chí bình thường 1 2 3
  • 4. Hệ vi khuẩn chí bình thường trong ruột Liệu pháp kháng sinh Phá vỡ sự cân bằng Tiêu chảy/ Viêm ĐT giả mạc liên quan kháng sinh Tăng sinh quá mức VK sinh độc tố Tăng sinh quá mức VK sinh độc tố
  • 5. T l tái h i nhi m trùng doỷ ệ ồ ễ Clostridium difficile gây khó khăn cho đi u trề ị Tái nhiễm Tái phát Tái phát: Đợt bệnh xảy ra trong vòng 2 tháng sau khi điều trị khỏi đợt bệnh thứ 1
  • 6.  C. difficile gây ra các vụ dịch tiêu chảy trong bệnh viện và cộng đồng.  3 triệu ca mới nhiễm C. difficile liên quan tới tiêu chảy tại Mỹ hàng năm, trong đó có14 000 ca tử vong  Người và động vật nuôi (lợn, gà) cùng là vật chủ mang vi khuẩn C. difficile trong đường ruột→sự lây truyền C. difficile từ lợn sang người??? D ch t h cị ễ ọ Các quốc gia có nhiễm trùng do Clostridium difficile típ chủng ribotype 027 Clements, ACA et al. Lancet Infect Dis 2010; 10:395-04.
  • 7. Clostridium difficile là trực khuẩn gram dương kỵ khí tuyệt đối sinh nha bào Tôi có th s ng sótể ố trong môi tr ng b nh vi n.ườ ệ ệ nha bào c a tôiủ không b tiêu di tị ệ b i c n sát khu nở ồ ẩ Vi khu n h cẩ ọ
  • 8. Đ c t A và B đóng vai trò quan tr ng trong quá trình sinhộ ố ọ b nh h c c a nhi m trùng doệ ọ ủ ễ Clostridium difficile Toxin A-positive Toxin B-positive A+ B+ Toxin A-negative Toxin B-positive A- B+ Toxin A-negative Toxin B-negative A- B- Actin-specific ADP-ribosyltransferase (Binary toxin, CDT)
  • 9. S c n thi t ti n hành nghiên c uự ầ ế ế ứ • Gần đây, nhiễm trùng do C. difficile xuất hiện thường xuyên, nặng nề hơn, khó đáp ứng điều trị và dễ tái phát. • Tỷ lệ mắc bệnh gia tăng gấp 2 lần so với giai đoạn 1996-2003 (McDonald et al Emerg Infect Dis 2006) • Chủng vi khuẩn gây bệnh mới xuất hiện có độc lực cao hơn do có biến đổi kiểu gen (đột biến mất đoạn ở gen sinh độc tố) hoặc xuất hiện thêm gen gắn độc tố và thường kháng kháng sinh dòng quinolon (Barbut et al Clin Microbiol Infect 2007) 9
  • 10.  Ở châu Á: C. difficile là tác nhân truyền nhiễm mới nổi của các nước Nhật Bản, Trung quốc, Singapore, Hàn Quốc và Thái Lan.  Ở Việt Nam: yếu tố gợi ý C. difficile là tác nhân vi khuẩn quan trọng bao gồm:  Thực trạng lạm dụng kháng sinh tại bệnh viện và cộng đồng cho người và động vật  Quá tải tại bệnh viện và kiểm soát nhiễm khuẩn bệnh viện kém hiệu quả  Sự phát triển rộng rãi của ngành công nghiệp chăn nuôi lợn Tuy nhiên, nghiên cứu về C. difficile chưa được chú ý quan tâm ở Việt Nam.
  • 11. M c tiêu nghiên c uụ ứ 1. Tìm hi u vai trò c a vi khu n C. difficile trên các qu n thể ủ ẩ ầ ể ng i và l n nuôiườ ợ 2. Xác đ nh đ c đi m sinh h c phân t c a ch ng vi khu n C.ị ặ ể ọ ử ủ ủ ẩ difficile gây b nh phân l p t b nh nhân m t s b nh vi nệ ậ ừ ệ ở ộ ố ệ ệ mi n B c Vi t Namở ề ắ ệ
  • 12. • Thiết kế nghiên cứu: mô tả cắt ngang • Địa điểm và thời gian nghiên cứu: • Hà Nội: 300 ca tiêu chảy người lớn, 4 bệnh viện , 03 năm, từ tháng 3/2013 đến 3/2016 • Nam Định: 638 ca tiêu chảy trẻ em, bệnh viện tỉnh Nam Định, từ 1/2013-1/2014 • Hà Nam: 94 mẫu phân chuồng lợn nuôi, Duy Tiên, Hà Nam, tháng 8/2015 Ph ng pháp nghiên c uươ ứ
  • 13. Viện VSDTTW BV Bạch Mai BV Bệnh nhiệt đới TƯ BV Đống ĐaBV Lão Khoa Khoa Lây/ ĐTTC ĐTTC HSCC Khoa Lây/ ĐTTC Bệnh nhân tiêu chảy sau dung kháng sinh M ng l i b nh vi n nghiên c u vạ ướ ệ ệ ứ ề C. difficile t i Hà N iạ ộ
  • 14. Tr l i k tả ờ ế quả Sàng l cọ Qui trình nghiên c uứ
  • 15. K thu t xét nghi m s d ng cho nghiên c uỹ ậ ệ ử ụ ứ • C y m u phân cho phân l p vi khu n k khí C. difficileấ ẫ ậ ẩ ị • Phát hi n đ c t A và B c a vi khu n gây b nh b ng ph ngệ ộ ố ủ ẩ ệ ằ ươ pháp PCR • Kĩ thu t phân lo i các ch ng vi khu n C. difficile m c đậ ạ ủ ẩ ở ứ ộ phân tử: kĩ thu t ribotyping, và gi i trình t genậ ả ự slpA 15
  • 16. 1. Nuôi cấy phân tìm vi khuẩn gây bệnh Chuyển 0,1 ml phân đã xử lý lên CCMA, tán đều
  • 17. Ủ kỵ khí các đĩa nuôi cấy sử dụng bình ủ hoặc túi ủ kỵ khí , đọc kết quả sau 48h Túi ủ kỵ khí Bình ủ kỵ khí Khí trường 80% N2, 10% C02 và 10% H2
  • 18. Định danh vi khuẩn gây bệnh Định danh sơ bộ : 　 hình thái khuẩn lạc trên môi trường nuôi cấy và hình thể vi khuẩn bằng phương pháp nhuộm Gram. Định danh xác định: bằng bộ sinh phẩm sinh hóa API 20A (Biomerieux, Pháp) và ngưng kết với kháng huyết thanh đặc hiệu của vi khuẩn (Nissui, Nhật Bản).
  • 19. 2. Xác định độc tố vi khuẩn: bằng 2 phương pháp • Vi khuẩn đã phân lập nuôi cấy qua đêm trong canh thang thịt chín, canh khuẩn sử dụng trực tiếp cho thử nghiệm sinh độc tố bằng bộ kit ImmunoCard Toxins A&B (Nissui, Nhật Bản). • Phát hiện gen sinh độc tố A và B bằng phương pháp PCR đơn mồi 300bp→ 200bp→ M 1 2 3 M 1 2 3 Tcd A Tcd B
  • 20. 3. Kĩ thu t phân lo i các ch ng vi khu n m c đ phân tậ ạ ủ ẩ ở ứ ộ ử: kĩ thu tậ ribotyping, PFGE và gi i trình t genả ự
  • 21. Bệnh viện Số mẫu xét nghiệm Số mẫu nuôi cấy dương tính với C. difficile Độc tố B positive B negative Bạch Mai 193 49 35 14 Bệnh Nhiệt đới TƯ 72 16 10 6 Lão Khoa 40 10 8 2 Đống Đa 53 16 10 6 Tổng số 358 91 63 28 1. Nhiễm trùng do C. difficile chiếm tỉ lệ đáng kể ở người lớn bị tiêu chảy sau dung kháng sinh ở Hà Nội (17,6%) 2. Tỉ lệ phân lập vi khuẩn C. difficile trong bệnh nhân bị tiêu chảy sau dung kháng sinh là 25,4% K t qu 1.ế ả Nhi m trùng do C. difficile t i 4 b nh vi n Hà N iễ ạ ệ ệ ở ộ
  • 22. Típ đ c t c a ch ng C. difficile gây b nhộ ố ủ ủ ệ t i m t s b nh vi n Hà N iạ ộ ố ệ ệ ở ộ Toxin genotype N % C. difficile genotype A+B+ 35 35.7 C. difficile genotype A-B+ 30 30.6 C. difficile genotype A-B- 33 33.7 T ng sổ ố 98 100.0 Không phát hiện chủng C. difficile mang đ c t kép cdtA/cdtBộ ố
  • 23. Molecular Typing results of toxigenic Clostridium difficile strains recovered from CDI cases at 4 hospital for in Hanoi, Vietnam • Típ ribotype thường gặp trong số các chủng C. difficile gây bệnh là 017, trf, og39 và cc835. • Kiểu trình tự slpA (slpA ST) thường gặp tương ứng là fr-01, og39-01 và kr- 03.1 Típ đ c tộ ố PCR ribotype slpA ST S ch ng phân l p theo b nhố ủ ậ ệ vi nệ T ng s ch ngổ ố ủ (%) Lão Khoa B nhệ nhi t đ iệ ớ Bach Mai Dong Da A+B+CDT- cr cr-01 1 1 (2.0) 001 gr-01 2 2 (4.1) okz gr-02 1 1 (2.0) cc835 kr-03.1 4 5 9 (18.4) 0g39 og39-01 2 2 5 2 11 (22.4) A-B+CDT- 017 fr-01 2 4 4 3 13 (26.5) trf fr-01 1 3 9 13 (24.5) T ng sổ ố 6 9 25 10 50
  • 24. S phân b các típ d ch t h c phân t c a ch ngự ố ị ễ ọ ử ủ ủ C. difficile theo không gian và th i gianờ 012345678 Clinicalward 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 Months 17 trf og39 cc845 001 cr okz 2012 20142013 2015 Típ ribotype trf - slpA ST fr-01 có xu hướng xuất hiện nổi trội trong khoảng thời gian gần đây, gợi ý khả năng hình thành chùm ca bệnh trong bệnh viện trong cùng thời điểm nhất định.
  • 25. Chùm ca b nh liên quan đ n ch ng C. difficileệ ế ủ ribotype trf - slpA ST fr-01 phát hi n t i Khoa Lây, b nh vi n B ch Mai năm 2014ệ ạ ệ ệ ạ PCR ribotyping định típ chủng vi khuẩn Clostridium difficile dựa trên phân tích đa hình. M; thang ADN chuẩn, 1, 3-6: chủng vi khuẩn Clostridium difficile A-B+ phân lập từ bệnh nhân khác, 2; chủng vi khuẩn Clostridium difficile A-B+ phân lập từ bệnh nhân Nguyễn Thị N, 7: chứng dương Clostridium difficile A-B+ ribotype 017 8: chứng dương Clostridium difficile A-B+ ribotype trf
  • 26. a. JND14-01 (okz) b. JND14-05 (og39) c. JND14-09 (og39) d. JND14-19 (cc835) e. JND14-23 (og39) f. JND14-24 (001) g. JND14-25 (cc835) h. JND14-26 (cc835) i. JND14-27 (og39) j. JND14-28 (og39) k. JND14-31 (cc835) l. JND14-34 (cc835) m. JND14-37 (cc835) 1. 001 2. 002 3. 014 4. smz PCR ribotyping pattern <A+ B+ CDT- > a a b c d e f g h i j k l m 1 2 3 4
  • 27. a. JND14-03 (017) b. JND14-07 (017) c. JND14-08 (017) d. JND14-10 (017) e. JND14-12 (trf) f. JND14-17 (017) g. JND14-18 (017) h. JND14-20 (017) i. JND14-30 (017) j. JND14-32 (017) k. JND14-35 (017) 1. 017 2. trf PCR ribotyping pattern <A- B+ CDT- > a b c d e f g h i j k 1 2
  • 28. 1. Detection rate of toxigenic Clostridium difficile among children with diarrhea ranged from 6.0 % to 9.3% 2. C. difficile A ＋ B+ strains 　 was more common in Nam Dinh (Northern Vietnam), whereas C. difficile A-B+ was more frequent in Dong Nai (Southern Vietnam) (P<0.0001). T l phát hi nỉ ệ ệ C. difficile tr b tiêu ch y và ng i kh e m nhở ẻ ị ả ườ ỏ ạ N s d ngtính(%)ố ươ N s d ngtính(%)ố ươ N s d ngtính(%)ố ươ Clostridiumdifficile 913 144(15.8) 430 82(19.1) 180 18(10) ToxigenicClostridiumdifficile 913 55(6.0) 430 40(9.3) 180 11(6.1) Clostridiumdifficile genotypingA+B+ 144 41(28.5) 82 13(15.9) 18 8(44.4) Clostridiumdifficile genotypingA-B+ 144 14(9.7) 82 27(32.9) 18 3(16.7) Clostridiumdifficile genotypingA-B- 144 89(61.8) 82 42(51.2) 18 7(38.9) Tr tiêuch y NamĐnhẻ ả ở ị Tr tiêuch y Đ ngNaiẻ ả ở ồng ikh em nh NamĐnườ ỏ ạ ở ị
  • 29. K t lu nế ậ 1. A significant proportion of Clostridium difficile infection was reported among adult population with antibiotics-associated diarrhea in some major hospitals in Hanoi, Vietnam. 2. The most predominant PCR ribotype found among C. difficile isolates in Vietnam were PCR ribotype 017, Og39 and cc835
  • 30. Recommendations 1. A good system for laboratory diagnosis of Clostridium difficile infection should be established in clinical laboratories in Vietnamese hospitals 2. Monitoring of the prevalence and molecular epidemiology of Clostridium difficile infection in Vietnam is needed to identify and control epidemics of Clostridium difficile infection
  • 31. L i c m nờ ả ơ
  • 32. Chúng tôi trân tr ng c m n s ng họ ả ơ ự ủ ộ và đóng góp ý ki n c a các Th y/ Côế ủ ầ

Editor's Notes

  • #5: Trong hệ tiêu hóa của người khỏe mạnh có một hệ vi khuẩn chí cân bằng. Khi bệnh nhân sử dụng kháng sinh, gây phá vỡ sự cân bằng của hệ vi khuẩn gây tăng sinh quá mức VK sinh độc tố dẫn đến tiêu chảy hoặc nặng hơn là viêm đại tràng giả mạc.