際際滷

際際滷Share a Scribd company logo

Prezentare doctorat

Download as PPT, PDF
ELENA POPA
ELENA POPA

Prezentare doctorat PPAR-alpha

1 of 69
Downloaded 14 times
UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE GRIGORE T. POPA IAI FACULTATEA DE MEDICIN Doctorand, ELENA HATNEANU (POPA) Conductor tiin釘ific, Prof. Univ. Dr. RODICA PETROVANU Iai - 2014 ROLUL RECEPTORILOR ACTIVA鄭I DE INDUCTORII PROLIFERRII PEROXIZOMILOR - ALPHA N SINDROMUL METABOLIC TEZ DE DOCTORAT 1
SINDROMUL METABOLIC rezistenta la insulina/hiperinsulinemie obezitate de tip central diabet zaharat/scaderea tolerantei la glucoza dislipidemie aterogena) hipertensiune arteriala status protrombotic disfunctie endoteliala hiperuricemie status proinflamator CLUSTER DE ALTERARI METABOLICE SI FACTORI DE RISC CARDIOVASCULARI 2
3 conditie clinica prediabetica alterari metabolice independente risc cardiovascular crescut prin initierea si perpetuarea procesului aterosclerotic si degenerativ inflamator insulinorezistenta si hiperinsulinemia compensatorie reprezenta elementul patogenic central
Sindrom metabolic - status- proinflamator 4
Relatia inflamatie sistemica -boli cronice 5
Receptorii activa釘i de ctre inductorii proliferrii peroxizomilor (Peroxisome proliferator- activated receptors-PPARs) receptori nucleari, de tip proteic, similar cu receptorii pentru hormonii steroidieni sau tiroidieni 6
PPAR - alpha ac釘ioneaz ca un factor de transcriere ligand activat. Dupa stimularea de catre ligand, se uneste cu receptorul RXR (Retinoid Receptor X )si regleaza actiunea genelor implicate in metabolismul acizilor grasi, inflamatie cr. 7
Studiul sindromului metabolic din punct de vedere al prevalen釘ei si status-ului proinflamator. Investigarea prezen釘ei i a nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR留 樽n leucocitele circulante 8
Studiul sindromului metabolic s-a desfurat 樽n dou etape: 1. studiul epidemiologic transversal, 2. studiul status-ului proinflamator la pacien釘ii cu sindrom metabolic (studiu- caz martor) 9
Lotul de studiu 1530 subiecti (815 femei si 715 barbati) cu v但rsta cuprins 樽ntre 18 i 91 ani, 樽nscris pe lista medicului de familie Dr. Popa Elena Perioada de desfurare 01.01.2013 31.12.2013 Subiec釘ii au fost programa釘i s participe la studiu 樽n luna naterii. 10
Criterii de includere : v但rsta peste 18 ani, capacitate de decizie, participare pe baza consim釘m但ntului liber informat domiciliul stabil 樽n Rom但nia. Criterii de excludere: v但rst sub 18 ani, femei gravide sau care alpteaz, bolnavi 樽n faza terminal, subiec釘i care au refuzat semnarea consim釘m但ntului informat. 11
IDF Criteriu obligatoriu: -Obezitate abdominal (CA 80 cm la femei, respectiv 94 cm la brba釘i sau IMC30 kg/m2 + minim dou criterii din urmtoarele: TAS 130 mmHg i/ sau TAD 85 mmHg sau tratament antihipertensiv instituit anterior; Glicemie 100mg/dl sau DZ diagnosticat anterior; Trigliceride 150 mg/dl sau tratament specific pentru hiperTG; HDL-col <40 mg/dl la brba釘i, respectiv < 50 mg/dl la femei sau tratament specific pentru aceast dislipidemie. NCEP ATP III Asocierea a minimum trei din urmtoarele criterii: Obezitate abdominal: (CA 102 cm la brba釘i, respectiv 88 cm la femei); TA130/85mmHg sau tratament antihipertensiv anterior; Glicemie 110 mg/dl; Trigliceride 150 mg/dl; HDL-col < 40 mg/dl la brba釘i, respectiv < 50 mg/dl la femei Harmonised I Asocierea a minimum trei din urmtoarele criterii: Obezitate abdominal (CA 80 cm la femei, respectiv 94 cm la brba釘i; TAS 130 mmHg i/ sau TAD 85 mmHg sau tratament antihipertensiv instituit anterior; Glicemie 100mg/dl sau DZ diagnosticat anterior; Trigliceride 150 mg/dl sau tratament specific pentru hiperTG; HDL-col <40 mg/dl la brba釘i, respectiv < 50 mg/dl la femei sau tratament specific pentru aceasta dislipidemie 12
Program de diagnostic al SM 樽ncadrarea pacien釘ilor func釘ie de componentele SM 樽n SM3, SM4, SM5 editarea i arhivarea unei fie de observa釘ie monitorizarea evolu釘iei pacien釘ilor compatibil cu softurile Microsoft Office Excel , SPSS i Medcalc Statistical Software . 13
Sex Clasificarea subiec釘ilor conform Harmonized Total non SM SM3 SM4 SM5 F 611 118 63 23 815 (53,3%) M 530 123 41 21 715 (46,7%) 1141 241 104 44 1530 74,60% 15,80% 6,80% 2,90% Tabel X: Reparti釘ia subiec釘ilor conform criteriilor Harmonized I Prevalen釘a brut SM - 25,42 % (95%CI: 22,96-28,08) Prevalen釘a standardizat a SM de 27,32 % (95% CI: 24,60-30,03). 14
ORa ORb Brba釘i vs femei 1,04 0,95 Grupa 35-54 ani 7,21 7,16 Sindrom metabolic vs 20-34 ani Grupa 55-69 ani 24,29 23,1 vs 20-34 ani Grupa 55-59 ani ani vs 35-54 ani 3,45 3,09 a -OR calculat pentru prevalen釘ele brute; b - OR calculat pentru prevalen釘ele standardizate ajustate pentru v但rsta i sex Compara釘ii 樽n lotul studiat ale prevalen釘elor SM conform Harmonised I 15
Sex Clasificarea subiec釘ilor conform criteriilor IDF Total Non SM SM3 SM4 SM5 F 640 91 61 23 815(53,3%) M 565 92 37 21 715(46,7%) 1205 183 98 44 1530 78,80% 12,00% 6,40% 2,90% 21,25% (B 20,98%; F- 21,47 %) Sex Clasificarea subiec釘ilor conform ATP III Non SM SM3 SM4 SM5 F 682 86 39 8 815(53,3%) M 619 69 21 6 715(46,7%) 1301 155 60 14 1530 85,00% 10,10% 3,90% 0,90% 14,97% (B 13,43%; F- 16,32 %) 16
Populatia studiata 1530 subiecti (815 femei si 715 barbati) recrutati pentru studiul epidemiologic Perioada de desfurare 01.01.2013 31.12.2013 Studiu de tip caz-martor Au fost comparate doua loturi: Lot cu sindrom metabolic Lot SM 389 subiecti Lot Control Lot fara SM 1141subiecti 17
Lot Control Numr 1141 Mediana 40,00 Percentila 25 29,00 Percentila 75 57,00 Lot SM Numr 389 Mediana 63,00 Percentila 25 52,00 Percentila 75 70,00 Figura 4.17: Compara釘ie 樽ntre cele dou loturi referitoare la v但rsta subiec釘ilor studia釘i Varsta(ani) 40 45 50 55 60 65 Lot Control Lot SM P < 0,0001 18
LDL-col(mg/dl) 120 125 130 135 140 145 Lot Control Lot SM P = 0,0002 LDL-col Non-HDL-col(mg/dl) 150 155 160 165 170 175 180 185 Lot Control Lot Non-HDL-col P < 0,0001 Non-HDL-col 19
Lot Control Numr 1141 Mediana 3,97 Percentila 25 3,37 Percentila 75 4,82 Lot SM Numr 389 Mediana 4,87 Percentila 25 3,84 Percentila 75 6,36 RaportColtotal/HDL-col 4,2 4,4 4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 5,8 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Raport Col total/HDL-col 20
Lot Control Numr 1141 Mediana 4,10 Percentila 25 3,84 Percentila 75 5,80 Lot SM Numr 389 Median 5,29 Percentila 25 4,50 Percentila 75 6,20 Aciduricmg/dl 4,4 4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Acid uric 21
Leucocite totale Eozinofile Limfocite Monocite PMN Leucocite/mm3 6750 6800 6850 6900 6950 7000 7050 7100 7150 Lot Control Lot SM P = 0,7565 Leucocite Eozinofile/mm3 160 170 180 190 200 210 220 230 240 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Eozinofile Limfocite/mm3 2220 2240 2260 2280 2300 2320 2340 2360 2380 2400 Lot Control Lot SM P = 0,8652 Limfocite Monocite/mm3 450 455 460 465 470 475 480 485 490 495 500 Lot Control Lot SM P = 0,340 Monocite PMN/mm3 3750 3800 3850 3900 3950 4000 4050 4100 4150 4200 Lot Control Lot SM P= 0,0864 PMN 22
Compara釘ie 樽ntre valorile fibrinogenului 樽n cele dou loturi Fibrinogen(mg/dl) 290 300 310 320 330 340 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Fibrinogen 0 50 100 150 200 250 300 350 400 Fibrinogen(mg/dl) non SM SM3 SM4 SM5 Fibrinogen 23
24 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 100-Specificitate Sensibilitate Non-HDL-C Col T/ HDL-C Acid uric Fibrinogen Eozinofile AUC 95%CI Non-HDL-Col 0,605 0,580 - 0,630 Col total/ HDL-col 0,607 0,642 - 0,691 Acid uric 0,655 0,630 - 0,679 Fibrinogen 0,690 0,658 - 0,720 Eozinofile 0,589 0,564 - 0,615 AUC 95%CI Scor SM Harmonised I 1,000 0,997- 1,000 CA 0,804 0,781- 0,825 TAD 0,666 0,639- 0,692 TAS 0,757 0,732- 0,780 Glicemie 0,742 0,717 - 0,766 TG 0,756 0,732-0,780 HDL- Col 0,636 0,609-0,662 ScorHarmonised I 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 100-Specificitate Sensibilitate Criterii diagnostic SM 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 100-Specificitate Sensibilitate CA TAD TAS Glicemie Trigliceride HDL-C
Studiu de tip caz- martor Au fost comparate doua loturi: Lotul cu sindrom metabolic Lot SM(26 pacienti Lotul normal - Lot Non-SM)(31pacienti) Material i metod studiu PPAR留 Perioada de desfasurare 1.01.2014- 28.02.2014 Candidatii au fost selectati si recrutati din populatia prezentata la consultatie la cabinetul medicului de familie 25
Lot SM v但rsta peste 18 ani recrutarea pe baza semnrii Consim釘m但ntului liber informat, SM nou-diagnosticat conform Harmonised I fr istoric de diabet zaharat si/sau boal cardio-vascular constituita absenta tratamentului cu agonisti PPAR 留 (fibrati) Lot Non-SM v但rsta peste 18 ani recrutarea pe baza semnrii Consim釘m但ntului liber informat absen釘a diagnosticului de SM, fr istoric de diabet zaharat si/sau boala cardiovasculara constituita 26
Studiul componentelor sindromului metabolic conform criteriilor Harmonised I - evaluarea clinica - s-a desfurat 樽n cadrul Cabinetului de Medicin de Familie - determinrile hematologice i biochimice s- au efectuat 樽n Laboratorul Ambulatorului Spitalului Sf. Spiridon Iai Evaluarea 樽n citometrie de flux a nivelului relativ de expresie a PPAR留 prin metoda citometriei 樽n flux in leucocitele circulante. - s-a desfurat 樽n Laboratorul de Biologie Molecular al Institutului Regional de Oncologie Iai 27
28
29
metod conven釘ional pentru marcare de suprafa釘 i evaluare pe baz de citometrie 樽n flux (cu focalizare pe monocite i utiliz但nd CD14 ca marker specific pentru monocite). Intensitatea Medie a Fluorescen釘ei (MFI) a anticorpilor anti-CD36 a fost utilizat ca msur a nivelului de expresie relativ a CD 36. 30
Au fost comparate doua loturi: Lot Non-SM (31 subiecti) si Lot SM (26 subiecti) Tabel XXV. Compara釘ie 樽ntre criteriile de diagnostic ale SM 樽n cele dou loturi Lot SM Lot Non-SM Valoarea P Circumferin釘a abdominal* (cm) 99,18 賊 10,75 79,38 賊 9,38 P < 0,001 Glicemia (mg/dl) 118,93 賊 49,57 90,14 賊 8,82 P < 0,01 Trigliceride (mg/dl) 189,47 賊 79,20 87,66 賊 27,79 P < 0,001 HDL-colesterol (mg/dl) 46,57 賊 10,26 57,71 賊 13,52 P = 0,001 Tensiunea arterial sistolic (mmHg) 132,50 賊 11,15 111,93 賊 13,64 P < 0,001 Tensiunea arterial diastolic (mmHg) 81,73 賊 9,48 72,09 賊 7,93 P < 0,001 Hipertensiunea arterial 69,23% 16,12% P < 0,001 Tulburri ale metabolismului glucidic 19,23% 3,22% P < 0,001 Hipertrigliceridemie 80,76% 12,90% P < 0,001 HDL-colesterol sczut 65,38% 16,12% P < 0,001 * - 31
Lot Non-SM Lot SM Valoarea P (t-Student) Colesteroltotal (mg/dl) 199,94 賊 36,81 223,75賊40,54 P = 0,02* Non-HDL-col (mg/dl) 144,28 賊 37,73 178,84 賊 39,11 P = 0,002 LDL-col(mg/dl) 119,35 賊 27,46 145,109 賊 36,11 P = 0,005* Aciduric(mg/dl) 4,60 賊 1,26 5,78賊1,39 P = 0,001 Monocite/mm3 521,03 賊 188,55 579,60 賊 228,81 P = 0,3 Limfocite/mm3 2082,00 賊 576,10 2450,00 賊 952,91 P = 0,09 PMN/mm3 3946,00 賊 1482,68 4141,92 賊 1362,85 P = 0,61 Eozinofile/mm3 148,10 賊 90,26 210,73 賊127,10 P = 0,03 Fibrinogen(mg/dl) 234,00 賊 41,55 318, 50 賊35,68 P < 0,0001* CRP (mg/dl) 1,59 賊 1,09 2,12賊1,29 P = 0,14 ASAT(U/l) 21,29 賊17,64 21,26 賊 5,99 P = 0,99 ALAT(U/l) 23,33 賊 21,49 28,396 賊 9,95 P = 0,24 Creatinina(mg/dl) 0,85 賊 0,20 0,91 賊 0,19 P = 0,27 Tabel XXVI. Compara釘ie 樽ntre caracteristicile loturilor 32
Tabel XXVII. Indicatori statistici calcula釘i pentru to釘i subiec釘ii investiga釘i 樽n popula釘ia de monocite N 57 Media 232,102 SD 68,6704 Mediana 226,000 Minimum 78,600 Maximum 379,000 Percentila 25 183,00 Percentila 75 279,50 33
1 6 11 16 21 26 31 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 MFIanti-PPAR留 228,2 110,6 345,8 51,8 404,6 Media LCI LCI 50 100 150 200 250 300 350 400 450 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot martor 1 6 11 16 21 26 31 36 -100 0 100 200 300 400 500 MFIanti-PPAR留 235,4 81,0 389,7 3,9 466,9 LCS LCI Media 34
Tabel XXVIII. Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n monocite Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 228,19 235,38 SD 58,19 77,17 Mediana 224,00 226,00 Minimum 128,00 78,600 Maximum 358,00 379,00 Percentila 25 183,00 183,00 Percentila 75 262,00 303,50 200 210 220 230 240 250 260 270 Lot SM Lot Non-SM P= 0,69 35
AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 199,50 Percentila 25 178,00 Percentila 75 227,00 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 248,00 Percentila 25 190,25 Percentila 75 317,00 Figura 5.15. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Mo func釘ie de AHC de HTA . ). MFIantiPPAR留_Mo 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 DA NU AHC HTA P=0,06 36
AHC Dislipidemie Numr 20 Mediana 197 Percentila 25 182,00 Percentila 75 243,00 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 230,00 Percentila 25 189,00 Percentila 75 300,50 Figura 5.16. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Mo func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留Mo 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 DA NU P = 0,20 AHC DISLIPIDEMIE 37
Tabel XXIX :Variabila MFI anti-PPAR留 Ly- statistica descriptiv N 57 Media 180,58 SD 56,00 Mediana 167,00 Minimum 74,80 Maximum 314,00 Percentila 25 139,50 Percentila 75 218,25 38
50 89 128 167 206 244 283 322 361 400 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 1 6 11 16 21 26 31 -50 0 50 100 150 200 250 300 350 400 MFIanti-PPAR留 181,8 59,5 304,1 -1,7 365,3 Media+2DS Media- 2DS 0 50 100 150 200 250 300 350 0 5 10 15 20 25 30 35 40 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot Non-SM 1 6 11 16 21 26 31 36 0 50 100 150 200 250 300 350 MFIanti-PPAR留 179,6 75,0 284,1 22,7 336,4 Media+2DS Media Media- 2DS 39
150 160 170 180 190 200 210 Lot SM Lot Non-SM P= 0,88 Tabel XXX: Statistica descriptiv - nivelul de expresie relativ a PPAR留 樽n limfocite Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 181,781 179,574 SD 61,16 52,29 Mediana 165,000 168,000 Minimum 81,300 74,800 Maximum 314,000 301,000 Percentila 25 134,00 145,750 Percentila 75 218,00 217,00 40
AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 160,00 Percentila 25 127,00 Percentila 75 171,00 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 187,00 Percentila 25 149,00 Percentila 75 231,75 Figura 5.22. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Ly func釘ie de AHC de HTA MFIanti-PPAR留Ly 130 140 150 160 170 180 190 200 210 DA NU AHC HTA P=0,09 41
AHC Dislipidemie prezente Numr 20 Mediana 158,00 Percentila 25 135,00 Percentila 75 186,50 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 179,00 Percentila 25 148,75 Percentila 75 224,25 Figura 5.23. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Ly func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留Ly 140 150 160 170 180 190 200 210 DA NU AHC DISLIPIDEMIE P=0,51 42
Analiza nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n neutrofile (PMN) Tabel XXXI . Variabila MFI anti-PPAR留 PMN statistica descriptiv N 55 Media 263,927 SD 70,6493 Mediana 255,000 Minimum 163,000 Maximum 419,000 Percentila 25 196,500 Percentila 75 312,750 43
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 5 10 15 20 25 30 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot Non-SM 1 6 11 16 21 26 31 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 MFIanti-PPAR留 262,7 124,4 401,0 55,3 470,2 Media + 2DS Media - 2 DS Media 1 6 11 16 21 26 31 36 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 MFIanti-PPAR留 264,8 123,0 406,6 52,2 477,4 Media+ 2DS Media - 2DS Media 44
Tabel XXXII . Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n PMN Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 262,73 264,80 SD 69,15 70,88 Mediana 259,00 255,00 Minimum 172,00 163,00 Maximum 395,00 419,00 Percentila 25 198,00 196,00 Percentila 75 305,00 315,00 230 240 250 260 270 280 290 300 Lot SM Lot Non-SM P=0,90 Compara釘ie 樽ntre nivelul de expresie a PPAR留 樽n PMN- lot SM vs Lot Non-SM 45
AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 224,00 Percentila 25 194,00 Percentila 75 279,50 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 273,00 Percentila 25 205,50 Percentila 75 336,75 Figura 5.29. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n PMN func釘ie de AHC de HTA MFIanti-PPAR留PM 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 DA NU AHC HTA P = 0,13 46
AHC Dislipidemie prezente Numr 20 Mediana 225,00 Percentila 25 193,50 Percentila 75 274,50 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 280,00 Percentila 25 222,00 Percentila 75 325,50 Figura 5.30. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n polimorfonucleare func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留PM 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 DA NU AHC DISLIPIDEMIE P = 0,17 47
Analiza nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n eozinofile Tabel XXXIII :Variabila MFI anti-PPAR留 Eo statistica descriptiv N 57 Media 1595,98 SD 431,571 Mediana 1638,00 Minimum 350,00 Maximum 2506,00 Percentila 25 1379,50 Percentila 75 1759,00 48
0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 10 20 30 40 50 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 MFI anti-PPAR 留 Frecentarelativa(%) Lot Non-SM 1 6 11 16 21 26 31 -500 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 MFIanti-PPAR留 1410,6 476,5 2344,7 9,4 2811,7 Media + 2DS Media- 2DS LCI LCS 1 6 11 16 21 26 31 36 500 1000 1500 2000 2500 3000 MFIanti-PPAR留 1722,1 970,8 2473,4 595,1 2849,0 LCI Media-2DS Media Media +2 DS LCS 49
Compara釘ie 樽ntre nivelul de expresie a PPAR留 樽n Eo- lot SM vs Lot Non-SM 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 Lot SM Lot Non-SM P=0,0072 Tabel XXXIV: Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n Eo Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 1410,57 1722,09 SD 476,04 375,65 Mediana 1424,50 1713,00 Minimum 350,00 685,00 Maximum 2337,00 2506,00 Percentila 25 1193,00 1532,25 Percentila 75 1697,00 1995,50 50
AUC 0,663 Eroarea standard 0,0805 Interval Confiden釘 95% 0,515- 0,790 Z statistic 2,021 Valoarea P (Aria = 0.5) 0,0433 Criteriu asociat 1533 Interval Confiden釘 95% 1314 - 1711 Sensibilitate 56,52 Specificitate 77,78 Curba ROC MFI anti-PPAR留 Eo 51
AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 1488,00 Percentila 25 1164,25 Percentila 75 1707,50 AHC HTA absente Numr: 35 Mediana 1708,50 Percentila 25 1437,00 Percentila 75 1950,00 Figura 5.37. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Eo func釘ie de AHC de HTA MFIanti-PPAR留凌 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 DA NU AHC HTA P=0,0023 52
AHC Dislipidemie Numr 20 Mediana 1632,0000 Percentila 25 1372,5000 Percentila 75 1735,7500 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 1682,0000 Percentila 25 1394,0000 Percentila 75 1950,0000 Figura 5.38. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n PMN func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留Eo 1400 1450 1500 1550 1600 1650 1700 1750 1800 1850 DA NU P = 0,67 AHC DISLIPIDEMIE 53
Analiza nivelului de expresie relativ a receptorilor CD36 Tabel XXXVI. Variabila MFI anti-CD36: statistic descriptiv. N 57 Media 3971, 33 Deviatia standard 1209,02 Mediana 3811,00 Minimum 877,00 Maximum 6933,00 Percentila 25 3231,25 Percentila 75 4650,50 54
1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 0 5 10 15 20 25 MFI anti-CD36 Frecventarelativa(%) Lot SM 0 1778 3556 5333 7111 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-CD36 Frecventarelativa(%) Lot Non - SM 1 6 11 16 21 26 31 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 Pacienti MFIanti-CD36 4290,3 2109,3 6471,4 1018,8 7561,9 LCI Media LCS 1 6 11 16 21 26 31 36 -1000 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 MFIanti-CD36 3703,8 1193,5 6214,1 -61,6 7469,2 Media + 2 DS Media Media - 2 DS 55
Compara釘ie 樽ntre nivelul de expresie a CD36 - lot SM vs Lot Non-SM Tabel XXXVII : Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a CD36 樽n monocite Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 4290,34 3703,77 Deviatia Standard 1090,51 1255,14 Mediana 4110,00 3628,00 Minimum 2664,00 817,00 Maximum 6933,00 6168,00 Percentila 25 3462,00 2737,50 Percentila 75 4690,00 4533,00 3200 3400 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 Lot SM Lot Non-SM P = 0,0676 56
AHC HTA Numr 22 Mediana 4428,00 Percentila 25 3552,75 Percentila 75 5194,75 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 3774,00 Percentila 25 3169,00 Percentila 75 4434,00 Figura 5.45. Compara釘ie 樽ntre expresia CD36 樽n Mo func釘ie de AHC de HTA MFIanti-CD36 3400 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 5000 DA NU AHC HTA P = 0,08 57
AHC Dislipidemie prezente Numr 20 Median 4089,00 Percentila 25 3503,50 Percentila 75 4991,00 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Median 3785,00 Percentila 25 3230,00 Percentila 75 4634,00 Figura 5.46. Compara釘ie 樽ntre expresia CD36 樽n Mo func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-CD36 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 5000 5200 DA NU P = 0,31 AHC DISLIPIDEMIE 58
Corelatii dintre receptorii PPAR留 樽n SM 59
Figura 5.48. Corela釘ii 樽ntre receptorii PPAR留 樽n lotul martor A. Mo vs PMN; B. Mo vs Ly; C. PMN vs Ly; 60
Figura 5.49. Corela釘ii 樽ntre expresia receptorilor PPAR留 樽n Eo i alte tipuri de receptori investiga釘i A.PPAR留 Eo i CD 36 (Lot SM) 61
Figura 5.50.Corela釘ii dintre receptorii PPAR留 i CA: A. Mo; B. Ly; C. PMN 62
Figura 5.54. Lot SM: Corela釘ii樽ntre expresia PPAR留 i HDL-col Figura 5.51. Lot SM: Corela釘ii 樽ntre expresia PPAR留 i TG 63
Figura 5.55. Lot SM: corela釘ia dintre expresia PPAR留 樽n Eo i acidul uric (A), respectiv PPAR留 i fibrinogen (B) B. 0 500 1000 1500 2000 2500 200 250 300 350 400 450 PPAR留 Eo Fibrinogenmg/dl r =- 0,36; P = 0,08 64
Aplicarea scorului de SM, alturi de implementarea algoritmului electronic de diagnostic contribuie la o prelucrare rapid, eficient i standardizat a informa釘iilor, la nivelul medicinei primare Prevalen釘a SM, calculat astfel 樽n cadrul studiului, este crescut (27,32%), 樽n concordan釘 cu datele raportate. Sindromul metabolic se caracterizeaz printr-un status inflamator cronic. Prin metoda citometriei 樽n flux, am demonstrat prezenta Receptorilor Activa釘i de Inductorii Proliferrii Peroxizomilor Alpha (PPAR留) 樽n toate popula釘iile de leucocite studiate (monocite, limfocite, polimorfonucleare, eozinofile), at但t 樽n lotul pacien釘ilor cu sindrom metabolic, c但t i 樽n lotul martor. 65
Acest studiu este primul care a demonstrat existen釘a unei scderi statistic semnificative a nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR留 樽n eozinofilele pacien釘ilor cu sindrom metabolic. confirm但nd cercetrile recente care au eviden釘iat rolul eozinofilelor i al receptorilor PPAR留 樽n obezitate, reglarea inflama釘iei cronice i aterogeneza. n popula釘iile de monocite, limfocite i polimorfonucleare, am observat corela釘ii puternice, semnificativ statistic 樽ntre expresia PPAR留 樽n aceste tipuri celulare, suger但nd existen釘a unui mecanism unic de control al inflama釘iei cronice la nivelul acestor celule, probabil diferit de cel din eozinofile. 66
67 La subiec釘ii cu sindrom metabolic, expresia relativ a PPAR留 樽n Eo este invers asociat cu expresia receptorului CD36 (receptor al particulelor de ox - LDL i propus ca un marker precoce al aterosclerozei), dovedind rolul antiinflamator al receptorilor PPAR留 la nivel endotelial. La pacien釘ii cu antecedente heredo-colaterale de hipertensiune arterial, nivelul de expresie al receptorilor PPAR留 樽n eozinofile i monocite este diminuat comparativ cu subiec釘ii fr antecedente familiale de hipertensiune arterial. Putem spune c studiul efectuat de noi, aduce informa釘ii importante legate de genez aterosclerozei i hipertensiunii arteriale. Prin studiul asocierilor dintre receptorii PPAR留 i componentele clinice ale sindromului metabolic am artat rolul acestor receptori 樽n determinismul obezit釘ii de tip central, nivelul expresiei relative a receptorilor PPAR留 fiind invers propor釘ional cu circumferin釘a abdominal.
n acelai timp, nivelul de expresie a PPAR留 樽n sindromul metabolic este asociat pozitiv cu concentra釘ia seric a HDL-colesterolului i invers asociat cu nivelul trigliceridelor serice, dovedind rolul acestor receptori 樽n diminuarea procesului inflamator cronic de la nivel vascular. La pacien釘ii cu sindrom metabolic, scderea expresiei receptorilor PPAR留 樽n eozinofile este corelat cu creterea unor markeri ai sindromului inflamator cronic cardiometabolic (acid uric, fibrinogen), ilustr但nd importanta receptorilor 樽n reglarea status-ului inflamator cronic din sindromul metabolic 68
69

More Related Content

Prezentare doctorat

  • 1. UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE GRIGORE T. POPA IAI FACULTATEA DE MEDICIN Doctorand, ELENA HATNEANU (POPA) Conductor tiin釘ific, Prof. Univ. Dr. RODICA PETROVANU Iai - 2014 ROLUL RECEPTORILOR ACTIVA鄭I DE INDUCTORII PROLIFERRII PEROXIZOMILOR - ALPHA N SINDROMUL METABOLIC TEZ DE DOCTORAT 1
  • 2. SINDROMUL METABOLIC rezistenta la insulina/hiperinsulinemie obezitate de tip central diabet zaharat/scaderea tolerantei la glucoza dislipidemie aterogena) hipertensiune arteriala status protrombotic disfunctie endoteliala hiperuricemie status proinflamator CLUSTER DE ALTERARI METABOLICE SI FACTORI DE RISC CARDIOVASCULARI 2
  • 3. 3 conditie clinica prediabetica alterari metabolice independente risc cardiovascular crescut prin initierea si perpetuarea procesului aterosclerotic si degenerativ inflamator insulinorezistenta si hiperinsulinemia compensatorie reprezenta elementul patogenic central
  • 4. Sindrom metabolic - status- proinflamator 4
  • 6. Receptorii activa釘i de ctre inductorii proliferrii peroxizomilor (Peroxisome proliferator- activated receptors-PPARs) receptori nucleari, de tip proteic, similar cu receptorii pentru hormonii steroidieni sau tiroidieni 6
  • 7. PPAR - alpha ac釘ioneaz ca un factor de transcriere ligand activat. Dupa stimularea de catre ligand, se uneste cu receptorul RXR (Retinoid Receptor X )si regleaza actiunea genelor implicate in metabolismul acizilor grasi, inflamatie cr. 7
  • 8. Studiul sindromului metabolic din punct de vedere al prevalen釘ei si status-ului proinflamator. Investigarea prezen釘ei i a nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR留 樽n leucocitele circulante 8
  • 9. Studiul sindromului metabolic s-a desfurat 樽n dou etape: 1. studiul epidemiologic transversal, 2. studiul status-ului proinflamator la pacien釘ii cu sindrom metabolic (studiu- caz martor) 9
  • 10. Lotul de studiu 1530 subiecti (815 femei si 715 barbati) cu v但rsta cuprins 樽ntre 18 i 91 ani, 樽nscris pe lista medicului de familie Dr. Popa Elena Perioada de desfurare 01.01.2013 31.12.2013 Subiec釘ii au fost programa釘i s participe la studiu 樽n luna naterii. 10
  • 11. Criterii de includere : v但rsta peste 18 ani, capacitate de decizie, participare pe baza consim釘m但ntului liber informat domiciliul stabil 樽n Rom但nia. Criterii de excludere: v但rst sub 18 ani, femei gravide sau care alpteaz, bolnavi 樽n faza terminal, subiec釘i care au refuzat semnarea consim釘m但ntului informat. 11
  • 12. IDF Criteriu obligatoriu: -Obezitate abdominal (CA 80 cm la femei, respectiv 94 cm la brba釘i sau IMC30 kg/m2 + minim dou criterii din urmtoarele: TAS 130 mmHg i/ sau TAD 85 mmHg sau tratament antihipertensiv instituit anterior; Glicemie 100mg/dl sau DZ diagnosticat anterior; Trigliceride 150 mg/dl sau tratament specific pentru hiperTG; HDL-col <40 mg/dl la brba釘i, respectiv < 50 mg/dl la femei sau tratament specific pentru aceast dislipidemie. NCEP ATP III Asocierea a minimum trei din urmtoarele criterii: Obezitate abdominal: (CA 102 cm la brba釘i, respectiv 88 cm la femei); TA130/85mmHg sau tratament antihipertensiv anterior; Glicemie 110 mg/dl; Trigliceride 150 mg/dl; HDL-col < 40 mg/dl la brba釘i, respectiv < 50 mg/dl la femei Harmonised I Asocierea a minimum trei din urmtoarele criterii: Obezitate abdominal (CA 80 cm la femei, respectiv 94 cm la brba釘i; TAS 130 mmHg i/ sau TAD 85 mmHg sau tratament antihipertensiv instituit anterior; Glicemie 100mg/dl sau DZ diagnosticat anterior; Trigliceride 150 mg/dl sau tratament specific pentru hiperTG; HDL-col <40 mg/dl la brba釘i, respectiv < 50 mg/dl la femei sau tratament specific pentru aceasta dislipidemie 12
  • 13. Program de diagnostic al SM 樽ncadrarea pacien釘ilor func釘ie de componentele SM 樽n SM3, SM4, SM5 editarea i arhivarea unei fie de observa釘ie monitorizarea evolu釘iei pacien釘ilor compatibil cu softurile Microsoft Office Excel , SPSS i Medcalc Statistical Software . 13
  • 14. Sex Clasificarea subiec釘ilor conform Harmonized Total non SM SM3 SM4 SM5 F 611 118 63 23 815 (53,3%) M 530 123 41 21 715 (46,7%) 1141 241 104 44 1530 74,60% 15,80% 6,80% 2,90% Tabel X: Reparti釘ia subiec釘ilor conform criteriilor Harmonized I Prevalen釘a brut SM - 25,42 % (95%CI: 22,96-28,08) Prevalen釘a standardizat a SM de 27,32 % (95% CI: 24,60-30,03). 14
  • 15. ORa ORb Brba釘i vs femei 1,04 0,95 Grupa 35-54 ani 7,21 7,16 Sindrom metabolic vs 20-34 ani Grupa 55-69 ani 24,29 23,1 vs 20-34 ani Grupa 55-59 ani ani vs 35-54 ani 3,45 3,09 a -OR calculat pentru prevalen釘ele brute; b - OR calculat pentru prevalen釘ele standardizate ajustate pentru v但rsta i sex Compara釘ii 樽n lotul studiat ale prevalen釘elor SM conform Harmonised I 15
  • 16. Sex Clasificarea subiec釘ilor conform criteriilor IDF Total Non SM SM3 SM4 SM5 F 640 91 61 23 815(53,3%) M 565 92 37 21 715(46,7%) 1205 183 98 44 1530 78,80% 12,00% 6,40% 2,90% 21,25% (B 20,98%; F- 21,47 %) Sex Clasificarea subiec釘ilor conform ATP III Non SM SM3 SM4 SM5 F 682 86 39 8 815(53,3%) M 619 69 21 6 715(46,7%) 1301 155 60 14 1530 85,00% 10,10% 3,90% 0,90% 14,97% (B 13,43%; F- 16,32 %) 16
  • 17. Populatia studiata 1530 subiecti (815 femei si 715 barbati) recrutati pentru studiul epidemiologic Perioada de desfurare 01.01.2013 31.12.2013 Studiu de tip caz-martor Au fost comparate doua loturi: Lot cu sindrom metabolic Lot SM 389 subiecti Lot Control Lot fara SM 1141subiecti 17
  • 18. Lot Control Numr 1141 Mediana 40,00 Percentila 25 29,00 Percentila 75 57,00 Lot SM Numr 389 Mediana 63,00 Percentila 25 52,00 Percentila 75 70,00 Figura 4.17: Compara釘ie 樽ntre cele dou loturi referitoare la v但rsta subiec釘ilor studia釘i Varsta(ani) 40 45 50 55 60 65 Lot Control Lot SM P < 0,0001 18
  • 19. LDL-col(mg/dl) 120 125 130 135 140 145 Lot Control Lot SM P = 0,0002 LDL-col Non-HDL-col(mg/dl) 150 155 160 165 170 175 180 185 Lot Control Lot Non-HDL-col P < 0,0001 Non-HDL-col 19
  • 20. Lot Control Numr 1141 Mediana 3,97 Percentila 25 3,37 Percentila 75 4,82 Lot SM Numr 389 Mediana 4,87 Percentila 25 3,84 Percentila 75 6,36 RaportColtotal/HDL-col 4,2 4,4 4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 5,8 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Raport Col total/HDL-col 20
  • 21. Lot Control Numr 1141 Mediana 4,10 Percentila 25 3,84 Percentila 75 5,80 Lot SM Numr 389 Median 5,29 Percentila 25 4,50 Percentila 75 6,20 Aciduricmg/dl 4,4 4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Acid uric 21
  • 22. Leucocite totale Eozinofile Limfocite Monocite PMN Leucocite/mm3 6750 6800 6850 6900 6950 7000 7050 7100 7150 Lot Control Lot SM P = 0,7565 Leucocite Eozinofile/mm3 160 170 180 190 200 210 220 230 240 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Eozinofile Limfocite/mm3 2220 2240 2260 2280 2300 2320 2340 2360 2380 2400 Lot Control Lot SM P = 0,8652 Limfocite Monocite/mm3 450 455 460 465 470 475 480 485 490 495 500 Lot Control Lot SM P = 0,340 Monocite PMN/mm3 3750 3800 3850 3900 3950 4000 4050 4100 4150 4200 Lot Control Lot SM P= 0,0864 PMN 22
  • 23. Compara釘ie 樽ntre valorile fibrinogenului 樽n cele dou loturi Fibrinogen(mg/dl) 290 300 310 320 330 340 Lot Control Lot SM P < 0,0001 Fibrinogen 0 50 100 150 200 250 300 350 400 Fibrinogen(mg/dl) non SM SM3 SM4 SM5 Fibrinogen 23
  • 24. 24 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 100-Specificitate Sensibilitate Non-HDL-C Col T/ HDL-C Acid uric Fibrinogen Eozinofile AUC 95%CI Non-HDL-Col 0,605 0,580 - 0,630 Col total/ HDL-col 0,607 0,642 - 0,691 Acid uric 0,655 0,630 - 0,679 Fibrinogen 0,690 0,658 - 0,720 Eozinofile 0,589 0,564 - 0,615 AUC 95%CI Scor SM Harmonised I 1,000 0,997- 1,000 CA 0,804 0,781- 0,825 TAD 0,666 0,639- 0,692 TAS 0,757 0,732- 0,780 Glicemie 0,742 0,717 - 0,766 TG 0,756 0,732-0,780 HDL- Col 0,636 0,609-0,662 ScorHarmonised I 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 100-Specificitate Sensibilitate Criterii diagnostic SM 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 100-Specificitate Sensibilitate CA TAD TAS Glicemie Trigliceride HDL-C
  • 25. Studiu de tip caz- martor Au fost comparate doua loturi: Lotul cu sindrom metabolic Lot SM(26 pacienti Lotul normal - Lot Non-SM)(31pacienti) Material i metod studiu PPAR留 Perioada de desfasurare 1.01.2014- 28.02.2014 Candidatii au fost selectati si recrutati din populatia prezentata la consultatie la cabinetul medicului de familie 25
  • 26. Lot SM v但rsta peste 18 ani recrutarea pe baza semnrii Consim釘m但ntului liber informat, SM nou-diagnosticat conform Harmonised I fr istoric de diabet zaharat si/sau boal cardio-vascular constituita absenta tratamentului cu agonisti PPAR 留 (fibrati) Lot Non-SM v但rsta peste 18 ani recrutarea pe baza semnrii Consim釘m但ntului liber informat absen釘a diagnosticului de SM, fr istoric de diabet zaharat si/sau boala cardiovasculara constituita 26
  • 27. Studiul componentelor sindromului metabolic conform criteriilor Harmonised I - evaluarea clinica - s-a desfurat 樽n cadrul Cabinetului de Medicin de Familie - determinrile hematologice i biochimice s- au efectuat 樽n Laboratorul Ambulatorului Spitalului Sf. Spiridon Iai Evaluarea 樽n citometrie de flux a nivelului relativ de expresie a PPAR留 prin metoda citometriei 樽n flux in leucocitele circulante. - s-a desfurat 樽n Laboratorul de Biologie Molecular al Institutului Regional de Oncologie Iai 27
  • 28. 28
  • 29. 29
  • 30. metod conven釘ional pentru marcare de suprafa釘 i evaluare pe baz de citometrie 樽n flux (cu focalizare pe monocite i utiliz但nd CD14 ca marker specific pentru monocite). Intensitatea Medie a Fluorescen釘ei (MFI) a anticorpilor anti-CD36 a fost utilizat ca msur a nivelului de expresie relativ a CD 36. 30
  • 31. Au fost comparate doua loturi: Lot Non-SM (31 subiecti) si Lot SM (26 subiecti) Tabel XXV. Compara釘ie 樽ntre criteriile de diagnostic ale SM 樽n cele dou loturi Lot SM Lot Non-SM Valoarea P Circumferin釘a abdominal* (cm) 99,18 賊 10,75 79,38 賊 9,38 P < 0,001 Glicemia (mg/dl) 118,93 賊 49,57 90,14 賊 8,82 P < 0,01 Trigliceride (mg/dl) 189,47 賊 79,20 87,66 賊 27,79 P < 0,001 HDL-colesterol (mg/dl) 46,57 賊 10,26 57,71 賊 13,52 P = 0,001 Tensiunea arterial sistolic (mmHg) 132,50 賊 11,15 111,93 賊 13,64 P < 0,001 Tensiunea arterial diastolic (mmHg) 81,73 賊 9,48 72,09 賊 7,93 P < 0,001 Hipertensiunea arterial 69,23% 16,12% P < 0,001 Tulburri ale metabolismului glucidic 19,23% 3,22% P < 0,001 Hipertrigliceridemie 80,76% 12,90% P < 0,001 HDL-colesterol sczut 65,38% 16,12% P < 0,001 * - 31
  • 32. Lot Non-SM Lot SM Valoarea P (t-Student) Colesteroltotal (mg/dl) 199,94 賊 36,81 223,75賊40,54 P = 0,02* Non-HDL-col (mg/dl) 144,28 賊 37,73 178,84 賊 39,11 P = 0,002 LDL-col(mg/dl) 119,35 賊 27,46 145,109 賊 36,11 P = 0,005* Aciduric(mg/dl) 4,60 賊 1,26 5,78賊1,39 P = 0,001 Monocite/mm3 521,03 賊 188,55 579,60 賊 228,81 P = 0,3 Limfocite/mm3 2082,00 賊 576,10 2450,00 賊 952,91 P = 0,09 PMN/mm3 3946,00 賊 1482,68 4141,92 賊 1362,85 P = 0,61 Eozinofile/mm3 148,10 賊 90,26 210,73 賊127,10 P = 0,03 Fibrinogen(mg/dl) 234,00 賊 41,55 318, 50 賊35,68 P < 0,0001* CRP (mg/dl) 1,59 賊 1,09 2,12賊1,29 P = 0,14 ASAT(U/l) 21,29 賊17,64 21,26 賊 5,99 P = 0,99 ALAT(U/l) 23,33 賊 21,49 28,396 賊 9,95 P = 0,24 Creatinina(mg/dl) 0,85 賊 0,20 0,91 賊 0,19 P = 0,27 Tabel XXVI. Compara釘ie 樽ntre caracteristicile loturilor 32
  • 33. Tabel XXVII. Indicatori statistici calcula釘i pentru to釘i subiec釘ii investiga釘i 樽n popula釘ia de monocite N 57 Media 232,102 SD 68,6704 Mediana 226,000 Minimum 78,600 Maximum 379,000 Percentila 25 183,00 Percentila 75 279,50 33
  • 34. 1 6 11 16 21 26 31 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 MFIanti-PPAR留 228,2 110,6 345,8 51,8 404,6 Media LCI LCI 50 100 150 200 250 300 350 400 450 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot martor 1 6 11 16 21 26 31 36 -100 0 100 200 300 400 500 MFIanti-PPAR留 235,4 81,0 389,7 3,9 466,9 LCS LCI Media 34
  • 35. Tabel XXVIII. Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n monocite Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 228,19 235,38 SD 58,19 77,17 Mediana 224,00 226,00 Minimum 128,00 78,600 Maximum 358,00 379,00 Percentila 25 183,00 183,00 Percentila 75 262,00 303,50 200 210 220 230 240 250 260 270 Lot SM Lot Non-SM P= 0,69 35
  • 36. AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 199,50 Percentila 25 178,00 Percentila 75 227,00 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 248,00 Percentila 25 190,25 Percentila 75 317,00 Figura 5.15. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Mo func釘ie de AHC de HTA . ). MFIantiPPAR留_Mo 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 DA NU AHC HTA P=0,06 36
  • 37. AHC Dislipidemie Numr 20 Mediana 197 Percentila 25 182,00 Percentila 75 243,00 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 230,00 Percentila 25 189,00 Percentila 75 300,50 Figura 5.16. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Mo func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留Mo 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 DA NU P = 0,20 AHC DISLIPIDEMIE 37
  • 38. Tabel XXIX :Variabila MFI anti-PPAR留 Ly- statistica descriptiv N 57 Media 180,58 SD 56,00 Mediana 167,00 Minimum 74,80 Maximum 314,00 Percentila 25 139,50 Percentila 75 218,25 38
  • 39. 50 89 128 167 206 244 283 322 361 400 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 1 6 11 16 21 26 31 -50 0 50 100 150 200 250 300 350 400 MFIanti-PPAR留 181,8 59,5 304,1 -1,7 365,3 Media+2DS Media- 2DS 0 50 100 150 200 250 300 350 0 5 10 15 20 25 30 35 40 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot Non-SM 1 6 11 16 21 26 31 36 0 50 100 150 200 250 300 350 MFIanti-PPAR留 179,6 75,0 284,1 22,7 336,4 Media+2DS Media Media- 2DS 39
  • 40. 150 160 170 180 190 200 210 Lot SM Lot Non-SM P= 0,88 Tabel XXX: Statistica descriptiv - nivelul de expresie relativ a PPAR留 樽n limfocite Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 181,781 179,574 SD 61,16 52,29 Mediana 165,000 168,000 Minimum 81,300 74,800 Maximum 314,000 301,000 Percentila 25 134,00 145,750 Percentila 75 218,00 217,00 40
  • 41. AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 160,00 Percentila 25 127,00 Percentila 75 171,00 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 187,00 Percentila 25 149,00 Percentila 75 231,75 Figura 5.22. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Ly func釘ie de AHC de HTA MFIanti-PPAR留Ly 130 140 150 160 170 180 190 200 210 DA NU AHC HTA P=0,09 41
  • 42. AHC Dislipidemie prezente Numr 20 Mediana 158,00 Percentila 25 135,00 Percentila 75 186,50 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 179,00 Percentila 25 148,75 Percentila 75 224,25 Figura 5.23. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Ly func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留Ly 140 150 160 170 180 190 200 210 DA NU AHC DISLIPIDEMIE P=0,51 42
  • 43. Analiza nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n neutrofile (PMN) Tabel XXXI . Variabila MFI anti-PPAR留 PMN statistica descriptiv N 55 Media 263,927 SD 70,6493 Mediana 255,000 Minimum 163,000 Maximum 419,000 Percentila 25 196,500 Percentila 75 312,750 43
  • 44. 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 0 5 10 15 20 25 30 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot Non-SM 1 6 11 16 21 26 31 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 MFIanti-PPAR留 262,7 124,4 401,0 55,3 470,2 Media + 2DS Media - 2 DS Media 1 6 11 16 21 26 31 36 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 MFIanti-PPAR留 264,8 123,0 406,6 52,2 477,4 Media+ 2DS Media - 2DS Media 44
  • 45. Tabel XXXII . Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n PMN Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 262,73 264,80 SD 69,15 70,88 Mediana 259,00 255,00 Minimum 172,00 163,00 Maximum 395,00 419,00 Percentila 25 198,00 196,00 Percentila 75 305,00 315,00 230 240 250 260 270 280 290 300 Lot SM Lot Non-SM P=0,90 Compara釘ie 樽ntre nivelul de expresie a PPAR留 樽n PMN- lot SM vs Lot Non-SM 45
  • 46. AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 224,00 Percentila 25 194,00 Percentila 75 279,50 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 273,00 Percentila 25 205,50 Percentila 75 336,75 Figura 5.29. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n PMN func釘ie de AHC de HTA MFIanti-PPAR留PM 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 DA NU AHC HTA P = 0,13 46
  • 47. AHC Dislipidemie prezente Numr 20 Mediana 225,00 Percentila 25 193,50 Percentila 75 274,50 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 280,00 Percentila 25 222,00 Percentila 75 325,50 Figura 5.30. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n polimorfonucleare func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留PM 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 DA NU AHC DISLIPIDEMIE P = 0,17 47
  • 48. Analiza nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n eozinofile Tabel XXXIII :Variabila MFI anti-PPAR留 Eo statistica descriptiv N 57 Media 1595,98 SD 431,571 Mediana 1638,00 Minimum 350,00 Maximum 2506,00 Percentila 25 1379,50 Percentila 75 1759,00 48
  • 49. 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 10 20 30 40 50 MFI anti-PPAR 留 Frecventarelativa(%) Lot SM 400 800 1200 1600 2000 2400 2800 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 MFI anti-PPAR 留 Frecentarelativa(%) Lot Non-SM 1 6 11 16 21 26 31 -500 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 MFIanti-PPAR留 1410,6 476,5 2344,7 9,4 2811,7 Media + 2DS Media- 2DS LCI LCS 1 6 11 16 21 26 31 36 500 1000 1500 2000 2500 3000 MFIanti-PPAR留 1722,1 970,8 2473,4 595,1 2849,0 LCI Media-2DS Media Media +2 DS LCS 49
  • 50. Compara釘ie 樽ntre nivelul de expresie a PPAR留 樽n Eo- lot SM vs Lot Non-SM 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 Lot SM Lot Non-SM P=0,0072 Tabel XXXIV: Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a PPAR留 樽n Eo Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 1410,57 1722,09 SD 476,04 375,65 Mediana 1424,50 1713,00 Minimum 350,00 685,00 Maximum 2337,00 2506,00 Percentila 25 1193,00 1532,25 Percentila 75 1697,00 1995,50 50
  • 51. AUC 0,663 Eroarea standard 0,0805 Interval Confiden釘 95% 0,515- 0,790 Z statistic 2,021 Valoarea P (Aria = 0.5) 0,0433 Criteriu asociat 1533 Interval Confiden釘 95% 1314 - 1711 Sensibilitate 56,52 Specificitate 77,78 Curba ROC MFI anti-PPAR留 Eo 51
  • 52. AHC HTA prezente Numr 22 Mediana 1488,00 Percentila 25 1164,25 Percentila 75 1707,50 AHC HTA absente Numr: 35 Mediana 1708,50 Percentila 25 1437,00 Percentila 75 1950,00 Figura 5.37. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n Eo func釘ie de AHC de HTA MFIanti-PPAR留凌 1000 1100 1200 1300 1400 1500 1600 1700 1800 1900 DA NU AHC HTA P=0,0023 52
  • 53. AHC Dislipidemie Numr 20 Mediana 1632,0000 Percentila 25 1372,5000 Percentila 75 1735,7500 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Mediana 1682,0000 Percentila 25 1394,0000 Percentila 75 1950,0000 Figura 5.38. Compara釘ie 樽ntre expresia PPAR留 樽n PMN func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-PPAR留Eo 1400 1450 1500 1550 1600 1650 1700 1750 1800 1850 DA NU P = 0,67 AHC DISLIPIDEMIE 53
  • 54. Analiza nivelului de expresie relativ a receptorilor CD36 Tabel XXXVI. Variabila MFI anti-CD36: statistic descriptiv. N 57 Media 3971, 33 Deviatia standard 1209,02 Mediana 3811,00 Minimum 877,00 Maximum 6933,00 Percentila 25 3231,25 Percentila 75 4650,50 54
  • 55. 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 0 5 10 15 20 25 MFI anti-CD36 Frecventarelativa(%) Lot SM 0 1778 3556 5333 7111 0 5 10 15 20 25 30 35 MFI anti-CD36 Frecventarelativa(%) Lot Non - SM 1 6 11 16 21 26 31 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 Pacienti MFIanti-CD36 4290,3 2109,3 6471,4 1018,8 7561,9 LCI Media LCS 1 6 11 16 21 26 31 36 -1000 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 MFIanti-CD36 3703,8 1193,5 6214,1 -61,6 7469,2 Media + 2 DS Media Media - 2 DS 55
  • 56. Compara釘ie 樽ntre nivelul de expresie a CD36 - lot SM vs Lot Non-SM Tabel XXXVII : Statistica descriptiv a nivelului de expresie relativ a CD36 樽n monocite Lot SM Lot Non-SM N 26 31 Media 4290,34 3703,77 Deviatia Standard 1090,51 1255,14 Mediana 4110,00 3628,00 Minimum 2664,00 817,00 Maximum 6933,00 6168,00 Percentila 25 3462,00 2737,50 Percentila 75 4690,00 4533,00 3200 3400 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 Lot SM Lot Non-SM P = 0,0676 56
  • 57. AHC HTA Numr 22 Mediana 4428,00 Percentila 25 3552,75 Percentila 75 5194,75 AHC HTA absente Numr 35 Mediana 3774,00 Percentila 25 3169,00 Percentila 75 4434,00 Figura 5.45. Compara釘ie 樽ntre expresia CD36 樽n Mo func釘ie de AHC de HTA MFIanti-CD36 3400 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 5000 DA NU AHC HTA P = 0,08 57
  • 58. AHC Dislipidemie prezente Numr 20 Median 4089,00 Percentila 25 3503,50 Percentila 75 4991,00 AHC Dislipidemie absente Numr 37 Median 3785,00 Percentila 25 3230,00 Percentila 75 4634,00 Figura 5.46. Compara釘ie 樽ntre expresia CD36 樽n Mo func釘ie de AHC de dislipidemie MFIanti-CD36 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 5000 5200 DA NU P = 0,31 AHC DISLIPIDEMIE 58
  • 60. Figura 5.48. Corela釘ii 樽ntre receptorii PPAR留 樽n lotul martor A. Mo vs PMN; B. Mo vs Ly; C. PMN vs Ly; 60
  • 61. Figura 5.49. Corela釘ii 樽ntre expresia receptorilor PPAR留 樽n Eo i alte tipuri de receptori investiga釘i A.PPAR留 Eo i CD 36 (Lot SM) 61
  • 62. Figura 5.50.Corela釘ii dintre receptorii PPAR留 i CA: A. Mo; B. Ly; C. PMN 62
  • 63. Figura 5.54. Lot SM: Corela釘ii樽ntre expresia PPAR留 i HDL-col Figura 5.51. Lot SM: Corela釘ii 樽ntre expresia PPAR留 i TG 63
  • 64. Figura 5.55. Lot SM: corela釘ia dintre expresia PPAR留 樽n Eo i acidul uric (A), respectiv PPAR留 i fibrinogen (B) B. 0 500 1000 1500 2000 2500 200 250 300 350 400 450 PPAR留 Eo Fibrinogenmg/dl r =- 0,36; P = 0,08 64
  • 65. Aplicarea scorului de SM, alturi de implementarea algoritmului electronic de diagnostic contribuie la o prelucrare rapid, eficient i standardizat a informa釘iilor, la nivelul medicinei primare Prevalen釘a SM, calculat astfel 樽n cadrul studiului, este crescut (27,32%), 樽n concordan釘 cu datele raportate. Sindromul metabolic se caracterizeaz printr-un status inflamator cronic. Prin metoda citometriei 樽n flux, am demonstrat prezenta Receptorilor Activa釘i de Inductorii Proliferrii Peroxizomilor Alpha (PPAR留) 樽n toate popula釘iile de leucocite studiate (monocite, limfocite, polimorfonucleare, eozinofile), at但t 樽n lotul pacien釘ilor cu sindrom metabolic, c但t i 樽n lotul martor. 65
  • 66. Acest studiu este primul care a demonstrat existen釘a unei scderi statistic semnificative a nivelului de expresie relativ a receptorilor PPAR留 樽n eozinofilele pacien釘ilor cu sindrom metabolic. confirm但nd cercetrile recente care au eviden釘iat rolul eozinofilelor i al receptorilor PPAR留 樽n obezitate, reglarea inflama釘iei cronice i aterogeneza. n popula釘iile de monocite, limfocite i polimorfonucleare, am observat corela釘ii puternice, semnificativ statistic 樽ntre expresia PPAR留 樽n aceste tipuri celulare, suger但nd existen釘a unui mecanism unic de control al inflama釘iei cronice la nivelul acestor celule, probabil diferit de cel din eozinofile. 66
  • 67. 67 La subiec釘ii cu sindrom metabolic, expresia relativ a PPAR留 樽n Eo este invers asociat cu expresia receptorului CD36 (receptor al particulelor de ox - LDL i propus ca un marker precoce al aterosclerozei), dovedind rolul antiinflamator al receptorilor PPAR留 la nivel endotelial. La pacien釘ii cu antecedente heredo-colaterale de hipertensiune arterial, nivelul de expresie al receptorilor PPAR留 樽n eozinofile i monocite este diminuat comparativ cu subiec釘ii fr antecedente familiale de hipertensiune arterial. Putem spune c studiul efectuat de noi, aduce informa釘ii importante legate de genez aterosclerozei i hipertensiunii arteriale. Prin studiul asocierilor dintre receptorii PPAR留 i componentele clinice ale sindromului metabolic am artat rolul acestor receptori 樽n determinismul obezit釘ii de tip central, nivelul expresiei relative a receptorilor PPAR留 fiind invers propor釘ional cu circumferin釘a abdominal.
  • 68. n acelai timp, nivelul de expresie a PPAR留 樽n sindromul metabolic este asociat pozitiv cu concentra釘ia seric a HDL-colesterolului i invers asociat cu nivelul trigliceridelor serice, dovedind rolul acestor receptori 樽n diminuarea procesului inflamator cronic de la nivel vascular. La pacien釘ii cu sindrom metabolic, scderea expresiei receptorilor PPAR留 樽n eozinofile este corelat cu creterea unor markeri ai sindromului inflamator cronic cardiometabolic (acid uric, fibrinogen), ilustr但nd importanta receptorilor 樽n reglarea status-ului inflamator cronic din sindromul metabolic 68
  • 69. 69