Rentat pool de plaquetes amb sistema sepax
0 likes140 views
Rentat pool de plaquetes amb sistema sepax
Rentat pool de plaquetes amb sistema sepax
- 1. RENTAT DE POOL DE PLAQUETES AMB SISTEMA SEPAX BIOSAFE 16 de novembre del 2019 AUTORS: Olga Magall坦n Pedrera, Mar鱈a Isabel Mart鱈n Dom鱈nguez, Marta Ravent坦s de la Fuente, Laura Ruiz Jacob, Almudena Soriano Ruiz LABORATORI DELABORACI DE COMPONENTS SANGUINIS
- 2. El rentat de pools de plaquetes 辿s una t竪cnica que sutilitza per eliminar les prote誰nes plasmtiques romanents en aquest component. Daquesta manera, els pacients que han sofert algun tipus de reacci坦 anafilactoide en anteriors transfusions poden rebre una nova transfusi坦 minimitzant aquell tipus de reacci坦. Actualment, aquest proc辿s es realitza segons un proc辿s semi- automtic de m辿s de dues hores de durada amb recuperacions superiors al 80% segons la t竪cnica T-FR-020.RENTAT DE POOLS DE PLAQUETES AMB COBE -2991 INTRODUCCI:
- 3. OBJECTIU: Validar el procediment del renta de plaquetes amb el separador automtic SEPAX. Aquest procediment ens permet reduir els temps del proc辿s, fer una connexi坦 est竪ril del producte amb lequip i millorar la qualitat de les plaquetes ja que obtenim un menor grau dactivaci坦.
- 4. MATERIAL I MTODES: Metodologia: Sha processat 4 pools de plaquetes amb el separador SEPAX (programa Smartwash, rentat estndard), segons diluci坦 1:0,5 amb soluci坦 de rentat (soluci坦 salina al 0,9%) i establint un volum de producte final de 200 ml. De les mostres obtingudes (producte inicial, final i sobrenedant del rentat) es determina lhemograma mitjan巽ant lanalitzador Sysmex i sestableix el contingut plaquetar de cada mostra i la recuperaci坦 respecte el valor inicial. Finalment, shan valorat un cinqu竪 i un sis竪 pool (producte de la mescla de dos pools de plaquetes) els quals shan processat el rentat amb la Cobe 2991 o amb el SEPAX aplicant una diluci坦 1/1. A m辿s en un daquests pools, per citometria de flux, sha comparat el grau dactivaci坦 de les plaquetes obtingudes amb els dos dispositius SEPAX versus COBE.
- 5. MATERIAL I MTODES: SEPAX COBE EQUIP SEPAX 1 LITRE SOL. SALINA EQUIP DE POOL EQUIP COBE 2 LITRES SOL. SALINA EQUIP DE POOL TRANSFER 300 ML CONNEXI ESTERIL DE LA BOSSA DE POOL AMB LEQUIP CONNEXI NO ESTERIL DE LA BOSSA DE POOL AMB LEQUIP SAFEGEIX SOL. SALINA FINS CAPACITAT MXIMA DE LA BOSSA DILLUCI 1:0,5 o 1:1 Centifugaci坦 sense aturades i resuspensi坦 del producte. Afegiment de la sol. Salina de forma paulatina segons el volum inicial. 3 cicles de centrifugaci坦 amb aturada i resuspensi坦 del producte. Centifugaci坦 a 3000 rpm Pool rentat directament a la bossa final sense necessitat de manipulaci坦 per part del t竪cnic.15 minuts dagitaci坦 i llest per subministrar. Pool rentat en bossa transit. Cal manipular i realitzar connexions no est竪rils per traspassar producte a bossa final. Mitja hora de rep嘆s, diluci坦 amb 200 ml de sol.salina de forma manual i mitja hora dagitaci坦.
- 6. RESULTATS: Rentat SEPAX dil.luci坦 1:0,5 Les recuperacions obtingudes del rentats de pools de plaquetes amb el separador automtic SEPAX han sigut superiors al 70% quan la t竪cnica emplea una diluci坦 1:0,5, valor per sota del l鱈mit establerts per la t竪cnica actual (80%). Recuperaci坦 rentat de PLQ SEPAX 1:0,5 (n=4) COBE (n=2) 50 60 70 80 90 100 %Recuperaci坦
- 7. RESULTATS: Rentat SEPAX dil.luci坦 1:1 Les recuperacions obtingudes del rentats de pools de plaquetes amb el separador automtic SEPAX han sigut properes/superiors al 80% quan la t竪cnica emplea una diluci坦 1:1, valor dins els l鱈mit establerts per la t竪cnica actual (80%). Recuperaci坦 rentat de PLQ COBE (n=2) SEPAX 1:1 (n=2) 50 60 70 80 90 100 %Recuperaci坦
- 8. Les plaquetes obtingudes amb el sistema SEPAX dil.luci坦 1:1 presenten una major puresa (98.4% versus 92.5%) i un menor grau dactivaci坦 (32.7% versus 47.3%) que les obtingudes amb la t竪cnica actual. RESULTATS: Activaci坦 Puresa/Activaci坦 PLQ (n=1) PoolInicialSEPAX ProducteSEPAX1:1 SbnSEPAX1:1 PoolInicialCOBE ProducteCOBE SbnCOBE 0 20 40 60 80 100 Puresa (% CD41) Activaci坦 (% CD62P) %Puresai%Activaci坦
- 9. CONCLUSIONS: Tot i una menor recuperaci坦 durant el rentat pel dispositiu SEPAX amb els parmetres de diluci坦 1/0,5 , aquest permet la automatitzaci坦 i la reducci坦 del temps del proc辿s de rentat (aproximadament 1 hora), al mateix temps que incrementa la qualitat de les plaquetes obtingudes ja que loperador no manipula el producte final quedant perfectament resusp竪s. Alhora el rentat de pool de plaquetes amb SEPAX amb els parmetres de diluci坦 1/1 ja que sha realitzat amb dues mostres ha donat molt bona recuperaci坦 i un menor grau dactivaci坦 de les plaquetes per citometria de flux.
- 10. PERSPECTIVA DE FUTUR: Realitzar com a m鱈nim 2 comparatives m辿s amb el sistema SEPAX vs. COBE ( diluci坦 1:1 al Sepax) per avaluar la recuperaci坦 i activaci坦 plaquetar i daquesta manera poder validar la t竪cnica tenint dades m辿s representatives. Aconseguir una bossa de soluci坦 salina que permeti una connexi坦 est竪ril amb lequip ( actualment es connexi坦 amb punxo) i daquesta manera sempre i quant la viabilitat de les plaquetes sigui la correcta, augmentar la caducitat del producte que ara per ara es de 6 hores.
- 11. AGRAIMENTS: A Lluis Martorell Cedr辿s, N炭ria Martinez Llonch i Elena Valdivia Garc鱈a per la seva implicaci坦 i ajuda en aquesta presentaci坦. A les companyes del Laboratori Cel揃lular per la realitzaci坦 de les citometries de les mostres. Als nostres companys de LECS per facilitar que durant el nostre temps de treball hgim pogut realitzar les diferents proves. I per 炭ltim, als organitzadors daquets congr辿s que ens ha permet ensenyar que a LECS la feina tamb辿 es important i interesant.