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吴岱颖

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乙玄 黃
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十字花科蔬菜花药培养之培养基研究 (A) 長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習 實習單位:鳳山熱帶園藝試驗分所 指導老師:邱金春老師 摘要 結果 影響花藥生成癒合組織的因子有花藥 表(一) 誘導率/% = 花藥胚狀體或愈傷組織數/ 接種花藥數×100% 本身的基因型、外在環境中的溫度、 表(一) 不同誘導培養基濃度下花藥癒傷組織的生成 培養基、生長激素及日照長度等都會 影響花藥癒合組織的形成。 濃度編號 接種花藥數 Callus數 誘導率/% (a)1.0 mg/L 2,4-D 這次所做的實驗是經由參考 + 0.5mg/L KT 42 2 4.8 文獻，發覺大部分的濃度都只做到 (b)2.0 mg/L 2,4-D 2 4.8 + 1.0mg/L KT 42 2.0 mg/L 2,4-D就沒有繼續往上實驗， (c)3.0 mg/L 2,4-D 2, 4-D的使用可促進花粉分裂，形成 + 1.5mg/L KT 34 5 17.7 癒傷組織，而Kinetin(KT)可以幫助 (d)4.0 mg/L 2,4-D 花藥誘導成植株，抑制癒傷組織的生 + 2.0mg/L KT 33 3 9.1 成，因此將2.0 mg/L 2,4-D+ 1.0mg/L Kinetin當做對照組，在設 (A) (B) 計3種不同的生長激素濃度，尋找出 最適合誘導出callus的濃度。 步驟 取花蕾2~3mm後， 將花蕾放入4℃冰箱 (A) 4.0 mg/L 2,4-D + 2.0mg/L KT誘導出 (C) 預處理3天 的擬胚，圈起來的即擬胚，在擬胚下方的 用75%酒精浸泡10~15秒，在進入0.1%NaOCl 是Callus(正面) (B) 2.0 mgL 2,4-D + 1.0mg/L KT誘導出 (展著劑)溶液中，用無菌水清洗3~4次。 植物的器官，圈起來的即分化出來的植物 器官 (葉子) 在用鑷子在顯微鏡下撥開花蕾， (C)這是分化後擬胚或植物若生長順利則會 變成植株的樣子(是由實驗室提供的照片) 取出花藥，移到三角瓶中培養。 結論 此次實驗觀察到3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT誘導率最高，但是 接種完將花藥放入30℃生長箱中培養 沒有分化出擬胚或器官，其次是4.0 mg/L 2,4-D + 2.0mg/L KT， 3天後 最後才是1.0 mg/L 2,4-D + 0.5mg/L KT和2.0 mg/L 2,4-D + 將花藥移至25℃暗處理下培養 1.0mg/L KT，此兩種濃度的誘導率相同。3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT和對照組相比誘導率更好，但4.0 mg/L 2,4-D + 1天後 2.0mg/L KT誘導率卻不如3.0 mg/L 2,4-D + 1.5mg/L KT，但濃度 在25℃弱光下培養並且觀察變化。 比對照組高的誘導率也有較高的趨勢。 此次實驗中設計的激素濃度確實會分化出擬胚及植物器官，而 能直接長成植株，代表已找到適合此植物的生長因子，有更進一步 致謝 研究的空間。 這次暑假實習很感謝鳳山熱帶園藝試驗分所的照顧，讓我度過一個特別的暑假，也謝謝蔬菜系主任讓我有這 個機會和邱金春老師學習植物組織培養的知識。 在試驗所實習期間，讓我覺得就算是一個實習生，而不是真正在裡面研究工作的人員，試驗所的各位老師或 職員也不會對實習生有不同的對待，而主任和各位老師也會教導我們不同的知識，若是有任何關於植物的問題 詢問主任或老師，也總是不吝嗇的為我們解答疑問，甚至會在補充更多關於植物的學問知識讓我們知道，而我 的指導老師也非常鼓勵實習生旁聽試驗所舉辦的演講會，而不單單只有植物組織培養方面的知識，也希望我們 能從演講的內容中啟發不一樣的靈感，學到更淵博的知識，當我在無菌台上笨手笨腳的切割蔬菜或是移植花藥 的癒傷組織時，研究助理員會教導我如何使蔬菜更不容易污染的小訣竅，也謝謝老師當我有不懂的問題時，總 是不厭其煩的和我講解，並且讓我知道每個步驟，都有它們各自的道理存在，讓我學到了很多植物組織培養的 知識。

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