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ヒト変異型肝細胞核因子(HNF-1α)遺伝子
 の導入による糖尿病モデルブタの作出


 ICSI-mediated gene transfer と体細胞核移植
 の組み合わせで病態モデルブタ作出が可能
ICSI-mediated gene transfer法
(精子ベクター法)による遺伝子導入
変异型ヒト肝细胞核因子(贬狈贵1α)遗伝子导入ブタ胎仔
迟驳胎仔细胞




                遺伝子改変細胞




         核移植

変異型ヒト肝細胞核因子遺伝子導入胎仔細胞の
   核移植によるクローンブタの生産
Human HNF-1α P291fsinsC
                                   dominant-negative型変異体の発現機序


                                   Human HNF1α



(1) atggtttct              (886)gggccccccccaggg(900)               tcccagtaa(1896)                  活性
    MV S                       G P P P G                           S Q STOP

                         転写?翻訳

     Dimerization     Homeobox                   Transactivation
        domain       DNA-binding                      domain
                        domain



                                                                                                    不活性


                            Human HNF1α -P291fsinsC



(1) atggtttct       (886)gggcccccccccagg(901) ccccagtaa(948)
    MV S                G P P P R             P Q STOP
                        転写?翻訳
                                                                                                    不活性


                                                                      Umeyama et al., Transgenic Research 2009
糖尿病トランスジェニック?クローンブタの诞生

             Umeyama et al., Transgenic Research 2009
700


Blood glucose (mg/dl)   600


                        500


                        400


                        300


                        200


                        100


                          0
                              0   14   28   42    56   70   84   98   112   126   140   154
                                                 Days after birth
                                                                  Umeyama et al., Transgenic Research 2009


    糖尿病モデル遺伝子改変ブタの随時血糖値の推移
1000



                         800
Blood glucose (mg/dl)
                         600



                         400



                         200



                           0
                               0    60     120   180        240        300

                               Time afte r administration (min.)

                                                       Umeyama et al., Transgenic Research 2009


  糖尿病モデルブタ経口糖付荷試験
450

                            400



Blood glucose ( mg/ d l )
                            350

                            300

                            250

                            200

                            150

                            100

                            50

                             0
                                  0       60        120        180         240

                                      Time after administration( min.)

                                                             Umeyama et al., Transgenic Research 2009

                            糖尿病モデルブタのインスリン反応性試験
変異型ヒトHNF1α 遺伝子導入ブタ膵臓の病理組織学的所見
           (抗インスリン抗体染色)




 対照 Day30   7.9Kg          Tg-個体(Di12) Day30 5.4Kg
                    X200                      X400


                           Umeyama et al., Transgenic Research 2009

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