ݺߣ

ݺߣShare a Scribd company logo
Improved Medical Education in Basic
Sciences
for Better Medical Practicing
ImproveMEd
Uklapanje i rezanje uzoraka
za histološku analizu
Fiksacija
Uklapanje
Rezanje
Bojenje
Osnovni postupci u pripremi tkiva za histološku analizu
- tkivo pripremljeno za proučavanje mikroskopom
Histološki preparat
Označavanje i vođenje uzorka
Dehidriranje
fiksacija
ispiranje u vodi
dehidriranje
alkoholni fiksativ
Bouinov fiksativ
za SM
70 % alkohol
96 % alkohol
100 % alkohol
osjetljiva tkiva,
veliki uzorci
50% alkohol
70 % alkohol
96 % alkohol
100 % alkohol
postfiksacija
dehidriranje
od 5 % do
100 %
alkohola ili
acetona
za EM
Prosvjetljavanje
Alkohol
Ksilol Parafin Svjetlosni mikroskop
Propilen oksid Plastične smole Elektronski mikroskop
Uklapanje
Parafin
Uklapanje
Prožimanje tkiva
Uklapanje
Formiranje blokova
- kalupi
Automatizirana obrada uzoraka
- od fiksacije do prožimanja parafinom
- formiranje blokova pod kontrolom djelatnika
- rezanje - ručno
- bojenje
Drugi mediji za uklapanje
Primjenjuju se ukoliko:
- reagensi korišteni u parafinskom postupku uklanjaju ili oštećuju
sastojke koji se proučavaju (lipidi)
- toplina prilikom uklapanje u parafin utječe na tkivo ili enzime
- medij za uklapanje nije dovoljno čvrst za tkivo
- su potrebni tanji rezovi
Sintetske
smole
Smrznuti
rezovi
Uklapanje uzoraka za analizu transmisijskim
elektronskim mikroskopom
Plastične smole
- otapalo za medij za uklapanje se postupno
zamjenjuje medijem za uklapanje
Fiksacija
Uklapanje
Rezanje
Bojenje
Osnovni postupci u pripremi tkiva za histološku analizu
Mikrotomi
Rotacijski
Klizni
Uklapanje i rezanje uzoraka za histološku analizu
Uklapanje i rezanje uzoraka za histološku analizu
Ravnanje i montiranje rezova
Uklapanje i rezanje uzoraka za histološku analizu
Adhezivna
stakla
Obična
stakla
Montiranje
rezova
Serijski rezovi
Priprema rezova za bojenje
Deparafiniranje – uranjanje rezova u ksilol (otapalo za parafin)
– uklanja se parafin iz reza
Rehidriranje – uranjanje rezova u alkohole sve niže koncentracije, a zatim u
vodu
Rezanje rezova za elektronsku
mikroskopiju (ultramikrotom)
Polutanki rezovi
- 0,1 – 2,5 µm
- analiza svjetlosnim mikroskopom
Ultratanki rezovi
- 8 – 100 nm
rezanje
vanjski promjer mrežice = 3mm
rezanje
Fiksacija
Uklapanje
Rezanje
Bojenje
Osnovni postupci u pripremi tkiva za histološku analizu

More Related Content

Uklapanje i rezanje uzoraka za histološku analizu