際際滷

際際滷Share a Scribd company logo
Princip i izvedba kapilarne
elektroforeze
Kapilarna elektroforeza
je izvedena u uskim kanalima (25 do 100 亮m i.d.),
fuzionirane silicijeve kapilare
primjenjuje visoke napone (do 30 kV) i visoka elektrina
polja (do 500 V / cm) preko kapilare
visoka otpornost kapilara ograniava proizvodnju
elektrine energije i unutarnje grijanje
ima visoku uinkovitost (Nu003e 105 do 106) i kratko
vrijeme analize
zahtijeva mali volumen uzorka (1 do 50 nL injektiran) i
djeluje u vodenom mediju,
ima brojne naine za promjenu selektivnosti, 邸irok raspon
primjene i automatsku instrumentaciju
Teorija kapilarne elektroforeze
Migracija komponenti
uzorka ovisi o:
Elektroforetska pokretljivost
(袖)
(odgovor otopljene tvari na
primijenjeno elektrino polje)
Elektroosmotski tijek (EOF)
(nastaje kada se pufer kree
kroz kapilaru kao odgovor na
primijenjeno elektrino polje)
Teorija kapilarne elektroforeze
Elektroforetska pokretljivost, 袖
亮ep = q6侶r
Elektroforetska brzina 僚ep (brzina otopljene tvari u odgovoru na primijenjeno
elektrino polje)
僚ep = 亮epE
僚ep i 亮ep e poveava za vi邸e napunjene otopine i za otopine manje veliine.
q  solute naboj; 侶 - viskoznost pufera; r -
radijus otopljene tvari.
亮ep - elektroforetska pokretljivost otopljene
tvari ; E - veliinu primijenjenog elektrinog
polja.
Teorija kapilarne elektroforeze
Elektroosmotski tijek (EOF)
 uzrokovan je nano邸enjem visokog napona
na kapilaru ispunjenu elektrolitom
Elektroosmotski tijek brzina, 僚eof
僚eof = 亮eofE E - primijenjeno elektrino polje,
亮eof elektrostosmotska pokretljivost pufera
竜 dielektrina konstanta otopine, 侶 - viskoznosti otopine
E - jaina polja, 龍 - zeta potencijal
Elektroosmotska pokretljivost, eof
eof = 竜龍4侶
Elektrososmotski tijek, 亮EOF
亮EOF=狼4侶E龍
Instrumentacija za kapilarnu elektroforezu
Shematski prikaz sustava kapilarne elektroforeze
Kapilarna
https://www.mun.ca/biology/scarr/Capillary_electrophoresis.html
Sustav ubrizgavanja
Otkrivanje
https://www.intechopen.com/books/electrophoresis/numerical-modelling-of-light-
propagation-for-development-of-capillary-electrophoretic-and-photochemi
Slino detektorima LC, ali povr邸ina pika ovisi o brzini kretanja kroz detektor i ne ovisi o vremenu zadr転avanja; Uglavnom "na
stupcu", tj. Kapilarnim oblicima protone elije
Kratka duljina staze daje smanjenu osjetljivost. Mo転da e biti potrebne neizravne metode za poveanje osjetljivosti
UV-VIS
Laserski inducirana fluorescencija (LIF)
Elektrosprejna ionizacija (ESI)
Kemiluminescencija
Tehnike kapilarne
elektroseparacije
Elektroforeza kapilarne zone (CZE)
Kapilarna elektrohromatografija
(CEC)
Micelarna elektrokinetika kapilarna kromatografija
(MECC ili MEKC)
Kapilarna izoelektrina fokusiranja (CIEF)
Elektroforeza kapilarnog gela (CGE)
Kapilarna izotahoforeza (CITP)
Kapilarni elektroforetski imunolo邸ki test (CEIA)
Kategorizacijatehnikaelektroforeze
Elektroforeza
Kontinuirani
sustav
Kinetiki proces
(CEC, CZE,
MEKC, CGE)
Proces stabilnog
stanja (CIEF)
Prekinuti sustav
(CITP)
Elektroforeza kapilarne zone (CZE)
 Odvajanje nabijenih molekula temeljenih na elektroforetskim
mobilnostima i brzinama migracije
 Detekcija nabijenih vrsta, ukljuujui anorganske anione i
katione, organske kiseline i amine, te velike biomolekule kao 邸to
su proteini.
EOF
- -- +
++
Anode
Catode
Elektroforeza kapilarnog gela (CGE)
 Uzorci se ubrizgaju elektrokinetiki.
 Razdvajanje velikih biomolekula, ukljuujui fragmente DNA,
proteine i oligonukleotide.
Anode Catode
Kapilarno izoelektrino fokusiranje (CIEF)
Razdvajanje biolo邸kih molekula uglavnom proteina, na temelju
razlika izmeu izoelektrinih toaka (pI)
-
+ -
- +
++
Anode Catode
- -- -
-
+
+
++
-
+
-
+
Micelarna elektrokinetika kromatografija (MEKC)
 Odvajanje neutralnih i nabijenih otopina
 Odvajanje neutralnih molekula temelji se na hidrofobnoj interakciji
otopljenih tvari s micelama.
 Razdvajanje velikog broja uzoraka, ukljuujui mje邸avine
farmaceutskih spojeva, vitamina i eksploziva
EOF flow
Anode Catode
Electroforetic velocity
of the micelle
micelle
analites
Kapilarna elektrokromatografija (CEC)
 Hibrid HPLC-a i C
 Kapilara je ispunjena stacionarnom
fazom, a selektivnost razdvajanja ovisi o
prekidu izmeu stacionarne i mobilne
faze.
 Razdvajanje blisko povezanih spojeva,
kratkog trajanja i poveane prolaznosti
uzorka.
 Dodatno razdvajanje pokretima rje邸ava
nabijene i neutralne komponente.
EOF flow
Anode Catode
https://www.sciencedirect.com/science/articl
e/pii/S0039914017310433
 Aplikacije u kapilarnoj elektroforezi
Kapilarna
elektroforeza
Biokemija
Farmakologija
Toksikologija
Kliniku
kemiju
Forenzika
kemija
Kemija

More Related Content

What's hot (20)

Kirhofova pravila
Kirhofova pravilaKirhofova pravila
Kirhofova pravila
Dejana Malievi
NEMETALI
NEMETALINEMETALI
NEMETALI
vvlivvli
Rastvori elektrolita
Rastvori elektrolitaRastvori elektrolita
Rastvori elektrolita
jasminalukic
舒仂亟仆舒 从亳亢亠于仆仂
舒仂亟仆舒 从亳亢亠于仆仂舒仂亟仆舒 从亳亢亠于仆仂
舒仂亟仆舒 从亳亢亠于仆仂
于舒仆舒 丶亠从亳
Kovalentna veza
Kovalentna vezaKovalentna veza
Kovalentna veza
Biljana Ristic
Estri
EstriEstri
Estri
Biljana Ristic
Alkoholi - Nata邸a Stojanovi - Jasmina Miljkovi
Alkoholi - Nata邸a Stojanovi - Jasmina MiljkoviAlkoholi - Nata邸a Stojanovi - Jasmina Miljkovi
Alkoholi - Nata邸a Stojanovi - Jasmina Miljkovi
鰻温邸温一看鉛温.鰻艶岳
Pasivni elektronski elementi
Pasivni elektronski elementiPasivni elektronski elementi
Pasivni elektronski elementi
bbilja
Proteini
Proteini Proteini
Proteini
Ivana Damnjanovi
kiseline-i-baze.ppt
kiseline-i-baze.pptkiseline-i-baze.ppt
kiseline-i-baze.ppt
isidorarani
Rastvori
RastvoriRastvori
Rastvori
JasminkaProdana
Ugljeni hidrati
Ugljeni hidratiUgljeni hidrati
Ugljeni hidrati
Shemija
亳仆亳亳舒仍仆亳 亠 亰舒 亠仆亳从亠 仂仄仂亞 舒亰亠亟舒
亳仆亳亳舒仍仆亳 亠 亰舒 亠仆亳从亠 仂仄仂亞 舒亰亠亟舒亳仆亳亳舒仍仆亳 亠 亰舒 亠仆亳从亠 仂仄仂亞 舒亰亠亟舒
亳仆亳亳舒仍仆亳 亠 亰舒 亠仆亳从亠 仂仄仂亞 舒亰亠亟舒
仆仂于仆舒 从仂仍舒 "亳仍亳于仂亠 仂仂于亳" 舒从舒
Podela narodne knji転evnosti ii 4
Podela narodne knji転evnosti  ii 4Podela narodne knji転evnosti  ii 4
Podela narodne knji転evnosti ii 4
dragadavid
Iste supstance i sme邸e
Iste supstance i sme邸eIste supstance i sme邸e
Iste supstance i sme邸e
Biljana Ristic
弌 弌 丕丕丐 丕 (3).ppt
弌 弌 丕丕丐  丕  (3).ppt弌 弌 丕丕丐  丕  (3).ppt
弌 弌 丕丕丐 丕 (3).ppt
Branislavivkovi1
Hemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_veza
Hemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_vezaHemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_veza
Hemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_veza
鰻温邸温一看鉛温.鰻艶岳
NEMETALI
NEMETALINEMETALI
NEMETALI
vvlivvli
Rastvori elektrolita
Rastvori elektrolitaRastvori elektrolita
Rastvori elektrolita
jasminalukic
Pasivni elektronski elementi
Pasivni elektronski elementiPasivni elektronski elementi
Pasivni elektronski elementi
bbilja
kiseline-i-baze.ppt
kiseline-i-baze.pptkiseline-i-baze.ppt
kiseline-i-baze.ppt
isidorarani
Ugljeni hidrati
Ugljeni hidratiUgljeni hidrati
Ugljeni hidrati
Shemija
Podela narodne knji転evnosti ii 4
Podela narodne knji転evnosti  ii 4Podela narodne knji転evnosti  ii 4
Podela narodne knji転evnosti ii 4
dragadavid
Iste supstance i sme邸e
Iste supstance i sme邸eIste supstance i sme邸e
Iste supstance i sme邸e
Biljana Ristic
弌 弌 丕丕丐 丕 (3).ppt
弌 弌 丕丕丐  丕  (3).ppt弌 弌 丕丕丐  丕  (3).ppt
弌 弌 丕丕丐 丕 (3).ppt
Branislavivkovi1
Hemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_veza
Hemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_vezaHemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_veza
Hemija r1 hemijska_veza_molekuli_i_kristali_zadaci_za_vezbanje_hemijska_veza
鰻温邸温一看鉛温.鰻艶岳

More from improvemed (20)

2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic
2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic
2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic
improvemed
In vitro models of hepatotoxicity
In vitro models of hepatotoxicityIn vitro models of hepatotoxicity
In vitro models of hepatotoxicity
improvemed
Etiology of liver diseases
Etiology of liver diseasesEtiology of liver diseases
Etiology of liver diseases
improvemed
An introduction to experimental epidemiology
An introduction to experimental epidemiology An introduction to experimental epidemiology
An introduction to experimental epidemiology
improvemed
Genotyping methods of nosocomial infections pathogen
Genotyping methods of nosocomial infections pathogenGenotyping methods of nosocomial infections pathogen
Genotyping methods of nosocomial infections pathogen
improvemed
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseases
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseasesUse of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseases
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseases
improvemed
Molecular microbiology methods
Molecular microbiology methodsMolecular microbiology methods
Molecular microbiology methods
improvemed
Isolated vascular rings
Isolated vascular ringsIsolated vascular rings
Isolated vascular rings
improvemed
Isolated blood vessels
Isolated blood vesselsIsolated blood vessels
Isolated blood vessels
improvemed
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
improvemed
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONSNotes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
improvemed
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposesNotes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
improvemed
Notes for
Notes for Notes for
Notes for
improvemed
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresisNotes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
improvemed
Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...
improvemed
Notes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic TechniquesNotes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic Techniques
improvemed
Big datasets
Big datasetsBig datasets
Big datasets
improvemed
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasetsSystems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
improvemed
Systems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicineSystems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicine
improvemed
Use cases
Use casesUse cases
Use cases
improvemed
2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic
2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic
2019 2020 predavanje letenje, ronjenje drenjancevic
improvemed
In vitro models of hepatotoxicity
In vitro models of hepatotoxicityIn vitro models of hepatotoxicity
In vitro models of hepatotoxicity
improvemed
Etiology of liver diseases
Etiology of liver diseasesEtiology of liver diseases
Etiology of liver diseases
improvemed
An introduction to experimental epidemiology
An introduction to experimental epidemiology An introduction to experimental epidemiology
An introduction to experimental epidemiology
improvemed
Genotyping methods of nosocomial infections pathogen
Genotyping methods of nosocomial infections pathogenGenotyping methods of nosocomial infections pathogen
Genotyping methods of nosocomial infections pathogen
improvemed
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseases
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseasesUse of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseases
Use of MALDI-TOF in the diagnosis of infectious diseases
improvemed
Molecular microbiology methods
Molecular microbiology methodsMolecular microbiology methods
Molecular microbiology methods
improvemed
Isolated vascular rings
Isolated vascular ringsIsolated vascular rings
Isolated vascular rings
improvemed
Isolated blood vessels
Isolated blood vesselsIsolated blood vessels
Isolated blood vessels
improvemed
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
Notes for Measuring blood flow and reactivity of the blood vessels in the ski...
improvemed
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONSNotes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
Notes for STAINING AND ANALYSIS of HISTOLOGICAL PREPARATIONS
improvemed
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposesNotes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
Notes for Fixation of tissues and organs for educational and scientific purposes
improvemed
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresisNotes for The principle and performance of capillary electrophoresis
Notes for The principle and performance of capillary electrophoresis
improvemed
Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...
Notes for The principle and performance of liquid chromatographymass spectro...
improvemed
Notes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic TechniquesNotes for Cell Culture Basic Techniques
Notes for Cell Culture Basic Techniques
improvemed
Big datasets
Big datasetsBig datasets
Big datasets
improvemed
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasetsSystems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
Systems biology for Medicine' is 'Experimental methods and the big datasets
improvemed
Systems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicineSystems biology for medical students/Systems medicine
Systems biology for medical students/Systems medicine
improvemed

Princip i izvedba kapilarne elektroforeze

  • 1. Princip i izvedba kapilarne elektroforeze
  • 2. Kapilarna elektroforeza je izvedena u uskim kanalima (25 do 100 亮m i.d.), fuzionirane silicijeve kapilare primjenjuje visoke napone (do 30 kV) i visoka elektrina polja (do 500 V / cm) preko kapilare visoka otpornost kapilara ograniava proizvodnju elektrine energije i unutarnje grijanje ima visoku uinkovitost (Nu003e 105 do 106) i kratko vrijeme analize zahtijeva mali volumen uzorka (1 do 50 nL injektiran) i djeluje u vodenom mediju, ima brojne naine za promjenu selektivnosti, 邸irok raspon primjene i automatsku instrumentaciju
  • 3. Teorija kapilarne elektroforeze Migracija komponenti uzorka ovisi o: Elektroforetska pokretljivost (袖) (odgovor otopljene tvari na primijenjeno elektrino polje) Elektroosmotski tijek (EOF) (nastaje kada se pufer kree kroz kapilaru kao odgovor na primijenjeno elektrino polje)
  • 4. Teorija kapilarne elektroforeze Elektroforetska pokretljivost, 袖 亮ep = q6侶r Elektroforetska brzina 僚ep (brzina otopljene tvari u odgovoru na primijenjeno elektrino polje) 僚ep = 亮epE 僚ep i 亮ep e poveava za vi邸e napunjene otopine i za otopine manje veliine. q solute naboj; 侶 - viskoznost pufera; r - radijus otopljene tvari. 亮ep - elektroforetska pokretljivost otopljene tvari ; E - veliinu primijenjenog elektrinog polja.
  • 5. Teorija kapilarne elektroforeze Elektroosmotski tijek (EOF) uzrokovan je nano邸enjem visokog napona na kapilaru ispunjenu elektrolitom Elektroosmotski tijek brzina, 僚eof 僚eof = 亮eofE E - primijenjeno elektrino polje, 亮eof elektrostosmotska pokretljivost pufera 竜 dielektrina konstanta otopine, 侶 - viskoznosti otopine E - jaina polja, 龍 - zeta potencijal Elektroosmotska pokretljivost, eof eof = 竜龍4侶 Elektrososmotski tijek, 亮EOF 亮EOF=狼4侶E龍
  • 6. Instrumentacija za kapilarnu elektroforezu Shematski prikaz sustava kapilarne elektroforeze
  • 9. Otkrivanje https://www.intechopen.com/books/electrophoresis/numerical-modelling-of-light- propagation-for-development-of-capillary-electrophoretic-and-photochemi Slino detektorima LC, ali povr邸ina pika ovisi o brzini kretanja kroz detektor i ne ovisi o vremenu zadr転avanja; Uglavnom "na stupcu", tj. Kapilarnim oblicima protone elije Kratka duljina staze daje smanjenu osjetljivost. Mo転da e biti potrebne neizravne metode za poveanje osjetljivosti UV-VIS Laserski inducirana fluorescencija (LIF) Elektrosprejna ionizacija (ESI) Kemiluminescencija
  • 10. Tehnike kapilarne elektroseparacije Elektroforeza kapilarne zone (CZE) Kapilarna elektrohromatografija (CEC) Micelarna elektrokinetika kapilarna kromatografija (MECC ili MEKC) Kapilarna izoelektrina fokusiranja (CIEF) Elektroforeza kapilarnog gela (CGE) Kapilarna izotahoforeza (CITP) Kapilarni elektroforetski imunolo邸ki test (CEIA)
  • 12. Elektroforeza kapilarne zone (CZE) Odvajanje nabijenih molekula temeljenih na elektroforetskim mobilnostima i brzinama migracije Detekcija nabijenih vrsta, ukljuujui anorganske anione i katione, organske kiseline i amine, te velike biomolekule kao 邸to su proteini. EOF - -- + ++ Anode Catode
  • 13. Elektroforeza kapilarnog gela (CGE) Uzorci se ubrizgaju elektrokinetiki. Razdvajanje velikih biomolekula, ukljuujui fragmente DNA, proteine i oligonukleotide. Anode Catode
  • 14. Kapilarno izoelektrino fokusiranje (CIEF) Razdvajanje biolo邸kih molekula uglavnom proteina, na temelju razlika izmeu izoelektrinih toaka (pI) - + - - + ++ Anode Catode - -- - - + + ++ - + - +
  • 15. Micelarna elektrokinetika kromatografija (MEKC) Odvajanje neutralnih i nabijenih otopina Odvajanje neutralnih molekula temelji se na hidrofobnoj interakciji otopljenih tvari s micelama. Razdvajanje velikog broja uzoraka, ukljuujui mje邸avine farmaceutskih spojeva, vitamina i eksploziva EOF flow Anode Catode Electroforetic velocity of the micelle micelle analites
  • 16. Kapilarna elektrokromatografija (CEC) Hibrid HPLC-a i C Kapilara je ispunjena stacionarnom fazom, a selektivnost razdvajanja ovisi o prekidu izmeu stacionarne i mobilne faze. Razdvajanje blisko povezanih spojeva, kratkog trajanja i poveane prolaznosti uzorka. Dodatno razdvajanje pokretima rje邸ava nabijene i neutralne komponente. EOF flow Anode Catode https://www.sciencedirect.com/science/articl e/pii/S0039914017310433
  • 17. Aplikacije u kapilarnoj elektroforezi Kapilarna elektroforeza Biokemija Farmakologija Toksikologija Kliniku kemiju Forenzika kemija Kemija