Princip i izvedba kapilarne elektroforeze
- 1. Princip i izvedba kapilarne elektroforeze
- 2. Kapilarna elektroforeza je izvedena u uskim kanalima (25 do 100 亮m i.d.), fuzionirane silicijeve kapilare primjenjuje visoke napone (do 30 kV) i visoka elektrina polja (do 500 V / cm) preko kapilare visoka otpornost kapilara ograniava proizvodnju elektrine energije i unutarnje grijanje ima visoku uinkovitost (Nu003e 105 do 106) i kratko vrijeme analize zahtijeva mali volumen uzorka (1 do 50 nL injektiran) i djeluje u vodenom mediju, ima brojne naine za promjenu selektivnosti, 邸irok raspon primjene i automatsku instrumentaciju
- 3. Teorija kapilarne elektroforeze Migracija komponenti uzorka ovisi o: Elektroforetska pokretljivost (袖) (odgovor otopljene tvari na primijenjeno elektrino polje) Elektroosmotski tijek (EOF) (nastaje kada se pufer kree kroz kapilaru kao odgovor na primijenjeno elektrino polje)
- 4. Teorija kapilarne elektroforeze Elektroforetska pokretljivost, 袖 亮ep = q6侶r Elektroforetska brzina 僚ep (brzina otopljene tvari u odgovoru na primijenjeno elektrino polje) 僚ep = 亮epE 僚ep i 亮ep e poveava za vi邸e napunjene otopine i za otopine manje veliine. q solute naboj; 侶 - viskoznost pufera; r - radijus otopljene tvari. 亮ep - elektroforetska pokretljivost otopljene tvari ; E - veliinu primijenjenog elektrinog polja.
- 5. Teorija kapilarne elektroforeze Elektroosmotski tijek (EOF) uzrokovan je nano邸enjem visokog napona na kapilaru ispunjenu elektrolitom Elektroosmotski tijek brzina, 僚eof 僚eof = 亮eofE E - primijenjeno elektrino polje, 亮eof elektrostosmotska pokretljivost pufera 竜 dielektrina konstanta otopine, 侶 - viskoznosti otopine E - jaina polja, 龍 - zeta potencijal Elektroosmotska pokretljivost, eof eof = 竜龍4侶 Elektrososmotski tijek, 亮EOF 亮EOF=狼4侶E龍
- 6. Instrumentacija za kapilarnu elektroforezu Shematski prikaz sustava kapilarne elektroforeze
- 9. Otkrivanje https://www.intechopen.com/books/electrophoresis/numerical-modelling-of-light- propagation-for-development-of-capillary-electrophoretic-and-photochemi Slino detektorima LC, ali povr邸ina pika ovisi o brzini kretanja kroz detektor i ne ovisi o vremenu zadr転avanja; Uglavnom "na stupcu", tj. Kapilarnim oblicima protone elije Kratka duljina staze daje smanjenu osjetljivost. Mo転da e biti potrebne neizravne metode za poveanje osjetljivosti UV-VIS Laserski inducirana fluorescencija (LIF) Elektrosprejna ionizacija (ESI) Kemiluminescencija
- 10. Tehnike kapilarne elektroseparacije Elektroforeza kapilarne zone (CZE) Kapilarna elektrohromatografija (CEC) Micelarna elektrokinetika kapilarna kromatografija (MECC ili MEKC) Kapilarna izoelektrina fokusiranja (CIEF) Elektroforeza kapilarnog gela (CGE) Kapilarna izotahoforeza (CITP) Kapilarni elektroforetski imunolo邸ki test (CEIA)
- 11. Kategorizacijatehnikaelektroforeze Elektroforeza Kontinuirani sustav Kinetiki proces (CEC, CZE, MEKC, CGE) Proces stabilnog stanja (CIEF) Prekinuti sustav (CITP)
- 12. Elektroforeza kapilarne zone (CZE) Odvajanje nabijenih molekula temeljenih na elektroforetskim mobilnostima i brzinama migracije Detekcija nabijenih vrsta, ukljuujui anorganske anione i katione, organske kiseline i amine, te velike biomolekule kao 邸to su proteini. EOF - -- + ++ Anode Catode
- 13. Elektroforeza kapilarnog gela (CGE) Uzorci se ubrizgaju elektrokinetiki. Razdvajanje velikih biomolekula, ukljuujui fragmente DNA, proteine i oligonukleotide. Anode Catode
- 14. Kapilarno izoelektrino fokusiranje (CIEF) Razdvajanje biolo邸kih molekula uglavnom proteina, na temelju razlika izmeu izoelektrinih toaka (pI) - + - - + ++ Anode Catode - -- - - + + ++ - + - +
- 15. Micelarna elektrokinetika kromatografija (MEKC) Odvajanje neutralnih i nabijenih otopina Odvajanje neutralnih molekula temelji se na hidrofobnoj interakciji otopljenih tvari s micelama. Razdvajanje velikog broja uzoraka, ukljuujui mje邸avine farmaceutskih spojeva, vitamina i eksploziva EOF flow Anode Catode Electroforetic velocity of the micelle micelle analites
- 16. Kapilarna elektrokromatografija (CEC) Hibrid HPLC-a i C Kapilara je ispunjena stacionarnom fazom, a selektivnost razdvajanja ovisi o prekidu izmeu stacionarne i mobilne faze. Razdvajanje blisko povezanih spojeva, kratkog trajanja i poveane prolaznosti uzorka. Dodatno razdvajanje pokretima rje邸ava nabijene i neutralne komponente. EOF flow Anode Catode https://www.sciencedirect.com/science/articl e/pii/S0039914017310433
- 17. Aplikacije u kapilarnoj elektroforezi Kapilarna elektroforeza Biokemija Farmakologija Toksikologija Kliniku kemiju Forenzika kemija Kemija