ݺߣ

ݺߣShare a Scribd company logo

EFFECT OF COMBINATION EXTRACT OF BAY LEAVES AND NIACIN TO LOWERING LDL LEVELS AND RAISE HDL LEVELS IN WHITE MALE RATS

•Download as DOCX, PDF•
•
J
Jung Nayla

Penelitian ini menguji pengaruh kombinasi ekstrak etanol daun salam dan niasin terhadap kadar LDL dan HDL pada tikus. Hasilnya menunjukkan bahwa pemberian ekstrak daun salam, niasin, dan kombinasi keduanya secara signifikan dapat menurunkan kadar LDL dan meningkatkan HDL pada tikus. Kombinasi dosis terbaik adalah ekstrak daun salam 90 mg dan niasin 27 mg."

1 of 13
Downloaded 11 times
1 EFEK KOMBINASI EKSTRAK ETANOLIK DAUN SALAM (Eugenia polyantha Wight.) DAN NIASIN TERHADAP PENURUNAN KADAR LDL DAN PENINGKATAN KADAR HDL PADA TIKUS PUTIH JANTAN EFFECT OF COMBINATION EXTRACT OF BAY LEAVES AND NIACIN TO LOWERING LDL LEVELS AND RAISE HDL LEVELS IN WHITE MALE RATS Pradita Setyaningrum1, Lucia Vita Inandha Dewi1, Vivin Nopiyanti1 1Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jl. Letjen Sutoyo, Mojosongo, Surakarta 57127 Telp.0271-852518 Korespondensi : dhecassie@gmail.com / lucia.vita@yahoo.com INTISARI Aterosklerosis merupakan etiologi primer dari penyakit jantung koroner. Meningkatnya LDL dan menurunnya HDL menyebabkan keadaan hiperlipidemia. Daun salam mengandung flavonoid yang mempunyai aktivitas antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian kombinasi ekstrak etanolik daun salam (Eugenia polyantha Wight.) dan niasin terhadap penurunan LDL dan peningkatan HDL pada tikus putih jantan. Penelitian ini menggunakan 30 ekor tikus putih jantan yang dibagi menjadi 6 kelompok uji. Ekstrak daun salam diperoleh dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Kelompok I (CMC 0,5%), kelompok II (niasin), kelompok III (ekstrak daun salam 180 mg/g BB tikus), kelompok IV sebagai (ekstrak daun salam 90 mg/g BB tikus dan niasin 27 mg/g BB tikus), kelompok V sebagai (ekstrak daun salam 135 mg/g BB tikus dan niasin 13,5 mg/g BB tikus) dan kelompok VI (ekstrak daun salam 45 mg/g BB tikus dan niasin 40,5 mg/g BB tikus). Analisis data menggunakan uji Kolmogorof Smirnov, ANOVA satu arah kemudian dilanjutkan dengan Post Hoc Test. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dosis tunggal ekstrak salam, kombinasi I, kombinasi II dan kombinasi III dapat menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL yang bermakna (p<0,05). Dosis kombinasi ekstrak etanol daun salam 90mg/200g BB : niasin 27 mg/200g BB tikus (50:50) paling efektif menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL. Kata kunci : daun salam, niasin, LDL, HDL ABSTRACT Atherosclerosis is an etiology of Coronary Heart Disease (CHD). Increasing LDL and decreasing HDL cause a state of hyperlipidemia. Bay leaves contain
2 flavonoids as an antioxidant. This study aimed to determine influence combination of ethanolic extract of bay leaves and niacin on LDL and HDL levels in male rats and to determine the dose combination are most effective to decrease LDL levels and increase HDL levels. This study used 30 male rats were divided into 6 groups. Bay leaves extracts obtained by maceration using ethanol 70%. Group I (CMC 0,5 %), Group II (niacin), Group III (bay leaves extract 180 mg/g rats BW), Group IV (bay leaves extract 90 mg/g rats BW and niacin 27 mg/g rats BW), Group V (bay leaves extract 135 mg/g rats BW and niacin 13,5 mg/g rats BW), Group VI (bay leaves extract 45 mg/g rats BW and niacin 40,5 mg/g rats BW). Analyzed by Kolmogorof Smirnov test, one-way ANOVA followed by Post Hoc Test. The results showed that bay leaves extract, combination I, combination II, combination III can lower LDL levels and raise HDL levels were significantly (p < 0,05). Combination dose of ethanol extract of bay leaves 90 mg/g rats BW and niacin 27 mg/g BW (50:50) most effectively lower LDL levels and raise HDL levels. Keyword : bay leaves, niacin, LDL, HDL PENDAHULUAN Hiperlipidemia merupakan suatu keadaan meningkatnya kadar lipid darah yang ditandai dengan meningkatnya kadar trigliserida, LDL, dan kolesterol total dalam darah yang melebihi batas normal. Hiperlipidemia merupakan penyebab utama aterosklerosis dan aterosklerosis berkaitan dengan penyakit jantung koroner (PJK), serebrovaskular iskemia dan penyakit pembuluh perifer (Goodman & Gilman 2007). Proses aterosklerosis yang terjadi di pembuluh darah jantung dapat memicu terjadinya penyakit jantung koroner, dan apabila terjadi di pembuluh darah otak dapat menyebabkan stroke. Menurut hasil survei dari Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Departemen Kesehatan Republik Indonesia melalui Survei Kesehatan Rumah Tangga (SKRT), sejak tahun 1992 sampai survei terbaru tahun 2004, PJK masih menempati urutan pertama penyakit kronis yang diderita dan penyebab kematian di Indonesia (Soemantri et al. 2005). Pengelolaan hiperlipidemia sangat berguna untuk menghindari terjadinya aterosklerosis. Perkembangan aterosklerosis dapat dihambat apabila kadar kolesterol
3 dalam darah berhasil dikontrol dengan baik, yaitu dengan menurunkan kadar LDL plasma dan meningkatkan kadar HDL plasma (Baraas 2003). Merebaknya kecenderungan atau gaya hidup kembali ke alam (back to nature) semakin menambah keingintahuan masyarakat tentang masyarakat tentang khasiat tanaman obat (Sudewo 2005). Daun salam merupakan daun yang sering dipergunakan sebagai bumbu pada masakan karena baunya yang sedap. Daun salam selain digunakan sebagai bumbu masakan, bisa juga digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit, antara lain diare, kencing manis, menurunkan kadar kolesterol yang tinggi, menurunkan tekanan darah tinggi, sakit maag, kudis, gatal- gatal (Dalimartha 2000). Secara ilmiah daun salam dapat digunakan sebagai antidiare (Nuratmi 1999), untuk menurunkan glukosa darah (Studiawan & Santosa 2005), menurunkan asam urat (Ariyanti et al. 2007; Muhtadi et al. 2012), antioksidan (Ekawati 2007), menurunkan LDL (Pidrayanti 2008), dan menaikkan HDL (Agung 2008). Hasil penelitian sebelumnya mengungkapkan bahwa ekstrak air daun salam (Eugenia polyantha Wight.) dapat memberikan efek penurunan kadar kolesterol (Prahastuti 2011). Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui pengaruh dosis kombinasi ekstrak etanol daun salam (Eugenia polyantha Wight.) dan niasin terhadap penurunan kadar LDL dan kenaikan kadar HDL pada tikus putih jantan galur wistar dan mengetahui perbandingan dosis kombinasi yang paling efektif untuk menurunkan kadar LDL dan menaikkan kadar HDL dalam darah tikus putih jantan galur wistar. METODE PENELITIAN Alat, Bahan, dan Hewan Uji Alat. Botol maserasi, kain flanel, timbangan elektrik, beaker glass, vakum, oven, rotary evaporator, blender dan ayakan no.40. Alat untuk mengukur kadar kelembaban adalah moisture balance. Bahan. Daun salam, etanol 70%, aquadest, propiltiourasil, CMC 0,5%,
4 niasin, reagen kit kolesterol, reagen LDL dan HDL. Hewan uji. Tikus putih jantan galur wistar dengan umur ± 3-4 bulan dengan berat badan ±200 g. Jalannya Penelitian Pembuatan ekstrak etanol 70% daun salam Daun salam yang telah dikeringkan, dibuat serbuk kemudian diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 70 %. Hasil ekstraksi diuapkan dengan penangas air hingga didapat ekstrak kental. Identifikasi Kandungan Kimia Daun Salam Identifikasi flavonoid. Sampel diencerkan dengan sedikit air ditambah serbuk Mg alkohol-HCl (1:1) dan pelarut amil alkohol dikocok kuat agar memisah. Reaksi positif ditunjukkan adanya warna merah/kuning/jingga pada lapisan amil alkohol. Identifikasi saponin. Sampel dididihkan dengan air kemudian didinginkan lalu dikocok dan didiamkan beberapa menit. Terbentuknya busa yang stabil berarti positif terdapat saponin. Identifikasi tanin. Identifikasi dilakukan dengan cara sampel dididihkan dengan 20 ml air lalu disaring. Ditambahkan beberapa tetes feriklorida 1% dan terbentuknya warna coklat kehijauan atau biru kehitaman menunjukkan adanya tanin. Uji Efek Hiperlipidemia Dosis Propiltiourasil. Suspensi propiltiourasil dibuat dengan melarutkan 1 tablet yang mengandung 100 mg propiltiourasil ditambah suspensi CMC 0,5% sampai volume 1000 ml. Dosis CMC 0,5 %. Suspensi CMC 0,5% dibuat sebanyak 500 mg dalam 100 ml aquadest. Dosis niasin. Dosis niasin yang digunakan adalah 3000 mg pada 70 kg BB manusia (54 mg/200g BB tikus). Dosis ekstrak. Variasi dosis ekstrak etanol daun salam yang digunakan adalah 1 DE (180 mg/200 g bb), kombinasi ekstrak daun salam 90 mg : niasin 27 mg (50 :50), kombinasi ekstrak daun salam 135 mg : niasin 13,5 mg (75 : 25) dan kombinasi ekstrak daun salam 45 mg : niasin 40,5 mg (25 : 75). Ekstrak daun salam dan
5 niasin disuspensikan dengan CMC 0,5% dan aquadest sampai 100 ml. Pemeriksaan kadar LDL dan HDL 30 ekor hewan uji dibagi menjadi 6 kelompok. Sebelum digunakan untuk percobaan, tikus diadaptasikan terlebih dahulu selama 7 hari, lalu diambil darahnya untuk diperiksa kadar LDL dan HDLnya. Pengambilan darah dilakukan dengan cara memasukkan pipa kapiler di daerah vena mata tikus. Darah yang mengalir ditampung dalam tabung, kemudian sampel didiamkan 15 menit lalu disentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 3000 rpm. Tahap selanjutnya tikus diinduksi dengan propiltiourasil 0,01% dan 1 butir telur puyuh/tikus selama 14 hari, lalu diperiksa kadar LDL dan HDL pada tikus. Tahap terakhir yaitu masing-masing kelompok diber perlakuan selama 14 hari. Pembagian kelompok perlakuan sebagai berikut: Kelompok I : kontrol negatif Kelompok II : niasin Kelompok III : ekstrak daun salam 180 mg/200 g bb Kelompok IV : kombinasi dosis ekstrak daun salam 90 mg dan niasin 27 mg (50 : 50) Kelompok V : kombinasi dosis ekstrak daun salam 135 mg dan niasin 13,5 mg (75 : 25) Kelompok VI : kombinasi dosis ekstrak daun salam 45 mg dan niasin 40,5 mg (25 : 75) Setelah 14 diberi perlakuan tikus diambil darahnya untuk diperiksa kadar LDL dan HDL setelah perlakuan. Metode yang digunakan untuk pemeriksaan kadar LDL dan HDL dalam penelitian ini adalah metode CHOD-PAP, kemudian pengukuran kadar LDL dan HDL menggunakan alat fotometer stardust. Analisa Data Analisis data terlebih dahulu dilihat apakah data tersebut terdistribusi normal atau tidak menggunakan uji distribusi normal (Kolmogorov Smirnov). Jika data tidak terdistribusi normal (p < 0,05) dilanjutkan dengan metode uji non parametik, sedangkan jika data terdistribusi normal (p > 0,05) dilanjutkan dengan uji parametik
6 (ANOVA). Analisis dilanjutkan dengan Post Hoc Test untuk mengetahui perbedaan mean antara kelompok tersebut signifikan atau tidak dengan menggunakan program SPSS for windows Release 17. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN Hasil identifikasi kandungan kimia daun salam. Hasil identifikasi kandungan kimia daun salam menyatakan ekstrak mengandung flavonoid, saponin, dan tanin. Hasil rata-rata penurunan kadar LDL Hasil rata-rata kadar LDL pada hari ke-0, hari ke-14 dan hari ke-28 setelah pemberian perlakuan peroral dapat dilihat pada tabel 1. Tabel 1. Rata-rata kadar LDL tikus putih jantan pada setiap kelompok perlakuan Kelompok Rata-rata LDL (mg/dL) Kenaikan (mg/dL) Penurunan (mg/dL) T0 T14 T28 Δ T14-T0 Δ T14-T28 I 46,2 131.4 124.8 85,4 6,6 II 44,4 128.4 67 84 61,4 III 43,2 132.4 83.2 89,2 49,2 IV 46 132 73.8 86 58,2 V 42,8 129.2 88.2 86,4 41 VI 46,6 135.4 93.4 88,8 42 Keterangan : Kelompok I : kontrol negatif Kelompok II : dosis tunggal niasin 54mg/200g BB tikus Kelompok III : dosis tunggal ekstrak daun salam180 mg/200g BB tikus Kelompok VI : dosis kombinasi I, daun salam 90 mg/200g BB tikus : niasin 27 mg/200g BB tikus (50 : 50) Kelompok V : dosis kombinasi II, daun salam 135 mg/200g BB tikus : niasin 13,5 mg/200g BB tikus (75 : 25) Kelompok VI : dosis kombinasi III, daun salam 45 mg/200g BB tikus : niasin 40,5 mg/200g BB tikus (25 : 75)
7 Gambar 1. Rata-rata kadar LDL serum tikus putih (mg/dL) Berdasarkan tabel di atas hasil dari analisis statistik menggunakan uji Kolmogorov Smirnov penurunan kadar LDL terdistribusi normal (p> 0,05). Varian data sama (p>0,05) dilanjutkan uji One-Way ANOVA dan uji Tukey HSD. Berdasarkan hasil uji Tukey HSD kelompok kontrol negatif berbeda nyata dengan semua kelompok perlakuan. Pada kelompok II niasin tidak memiliki perbedaan yang nyata dengan kelompok III, IV, V dan VI. Dosis ekstrak daun salam 90 mg : niasin 27 mg (50 : 50) dianggap efektif karena merupakan dosis yang paling berpengaruh terhadap penurunan LDL dengan rata-rata penurunan kadar LDL lebih besar dari dosis tunggal, kombinasi ekstrak daun salam 135 mg : niasin 13,5 mg (75 : 25) dan kombinasi ekstrak daun salam 45 mg : niasin 40,5 mg (25 : 75). Niasin dan ekstrak menurunkan kadar LDL dengan mekanisme yang berbeda. Niasin mengurangi kadar kolesterol dengan cara melibatkan penghambatan sekresi VLDL, yang selanjutnya menurunkan produksi LDL. Menurut Nidjveldt (2001) flavonoid merupakan antioksidan karena dapat menangkap radikal bebas dengan membebaskan atom hidrogen dari gugus hidroksilnya, dikatakan juga bahwa flavonoid dapat menghalangi reaksi oksidasi LDL dalam tubuh. Kerusakan endotelium 0 50 100 150 I II III IV V VI kadarrata-rataLDL(mg/dL) kelompok perlakuan Histogram PenurunanLDL T0 T14 T28
8 yang disebabkan keadaan hiperlipidemia ini memicu reaksi oksidasi yang dapat dihambat oleh preparat antioksidan seperti flavonoid, dalam dosis kecil flavonoid telah mampu melebarkan pembuluh darah, juga menurunkan tingkat oksidasi LDL (Suharti 2009). Flavonoid diketahui meningkatkan reseptor LDL sebanyak lima kali dan meningkatkan kemampuan LDL untuk terikat pada reseptor sebesarnya dua kali (Wilcox et al. 2001). Kandungan saponin dalam ekstrak daun salam memiliki mekanisme hipolipidemia melalui penurunan sintesis kolesterol dengan menghambat aktivitas HMG-CoA reductase dan peningkatan ekskresi asam empedu akibat meningkatnya konversi kolesterol menjadi asam empedu, saponin juga mampu mengubah absorbsi kolesterol dan asam empedu dengan menginterupsi formasi misel, sehingga kolesterol tidak dapat diabsorbsi. Disisi lain, saponin berperan dalam meningkatkan pergantian atau pengelupasan sel usus melalui tindakan membranolytic sehingga meningkatkan hilangnya kolesterol di membran sel ke dalam sel yang terkelupas (Afrose et al. 2010). Mekanisme hipolipidemia ekstrak daun salam juga didukung juga oleh zat fitokimia tanin. Tanin dapat menghambat enzim HMG-CoA reductase yang berperan mensintesis kolesterol dan enzim ACAT yang bertanggung jawa dalam esterifikasi kolesterol. Terhambatnya aktivitas HMG-CoA reductase akan menurunkan sintesis kolesterol di hati sehingga menurunkan sintesis Apo B- 100 dan meningkatkan reseptor LDL pada permukaan hati. Dengan demikian, kolesterol LDL darah akan ditarik ke hati sehingga menurunkan LDL dan VLDL (Do et al. 2011). Hasil rata-rata peningkatan kadar HDL Hasil rata-rata kadar HDL pada hari ke-0, hari ke-14 dan hari ke-28 setelah pemberian perlakuan peroral dapat dilihat pada tabel 2.
9 Tabel 2. Rata-rata kadar HDL tikus putih jantan pada setiap kelompok perlakuan Kelompok Rata-rata HDL (mg/dL) Penurunan (mg/dL) Kenaikan (mg/dL) T0 T14 T28 Δ T0-T14 Δ T28-T14 I 69,2 32,4 39,6 36,8 7,2 II 71,8 35,4 69,8 36,4 34,4 III 67,4 35,6 58,2 31,8 22,6 IV 67,6 33 63 34,6 30 V 68,8 33,6 55,6 35,2 22 VI 70,6 34,6 51 36 16,4 Keterangan : Kelompok I : kontrol negatif Kelompok II : dosis tunggal niasin 54mg/200g BB tikus Kelompok III : dosis tunggal ekstrak daun salam180 mg/200g BB tikus Kelompok VI : dosis kombinasi I, daun salam 90 mg/200g BB tikus : niasin 27 mg/200g BB tikus (50 : 50) Kelompok V : dosis kombinasi II, daun salam 135 mg/200g BB tikus : niasin 13,5 mg/200g BB tikus (75 : 25) Kelompok VI : dosis kombinasi III, daun salam 45 mg/200g BB tikus : niasin 40,5 mg/200g BB tikus (25 : 75) Gambar 2. Rata-rata kadar HDL serum tikus putih (mg/dL) 0 20 40 60 80 I II III IV VI VI kadarrata-rataHDL(mg/dL) kelompok perlakuan Histogram PeningkatanHDL T0 T14 T28
10 Berdasarkan tabel di atas hasil dari analisis statistik menggunakan uji Kolmogorov Smirnov peningkatan kadar HDL terdistribusi normal (p> 0,05). Varian data sama (p>0,05) dilanjutkan uji One-Way ANOVA dan uji Tukey HSD. Berdasarkan hasil uji Tukey HSD kelompok kontrol negatif berbeda nyata dengan kelompok II dan IV. Pada kelompok II niasin tidak memiliki perbedaan yang nyata dengan kelompok III, IV, dan V. Dosis ekstrak daun salam 90 mg : niasin 27 mg (50 : 50) dianggap efektif karena merupakan dosis yang paling berpengaruh terhadap kenaikan HDL dengan rata- rata kenaikan kadar HDL lebih besar dari ekstrak daun salam 180 mg, kombinasi ekstrak daun salam 135 mg : niasin 13,5 mg (75 : 25) dan kombinasi ekstrak daun salam 45 mg : niasin 40,5 mg (25 : 75). Niasin dan ekstrak dapat meningkatkan HDL dengan mekanisme yang berbeda. Niasin yang dapat meningkatkan kadar kolesterol HDL karena mampu menurunkan katabolisme Apo A-1 yang merupakan penyusun utama HDL (Nelwan 2012). Ekstrak daun salam mengandung flavonoid yang diduga dapat meningkatkan kadar HDL dengan cara meningkatkan produksi Apo A1 (Guillaume et al. 2001). Apo A1 bertugas sebagai kofaktor enzim untuk LCAT serta sebagai ligand untuk interaksi dengan reseptor lipoprotein dalam jaringan pada HDL. Dengan adanya peningkatan Apo A1 diharapkan dapat meningkatkan kadar koletserol HDL. HDL yang mengandung Apo A1 bersifat protektif terhadap aterosklerosis (Murray et al. 2003). Kesimpulan Pertama, pemberian kombinasi ekstrak etanol 70% daun salam dan niasin dapat menurunkan kadar LDL pada tikus putih jantan dan meningkatkan kadar HDL pada tikus putih jantan. Kedua, dosis kombinasi ekstrak etanolik daun salam 90 mg/g BB : niasin 27 mg/g BB (50:50) paling efektif menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL pada tikus
11 putih jantan yang ditunjukkan dengan penurunan dan kenaikan yang lebih besar dibandingkan dengan dosis lain. Saran Pertama, perlu penelitian efek jangka panjang pemberian kombinasi ekstrak daun salam dan niasin terhadap penurunan kadar kolesterol LDL dan peningkatan kadar kolesterol HDL. Kedua, perlu dilakukan penelitian profil kinetika kadar niasin dalam darah setelah pemberian ekstrak daun salam. DAFTAR PUSTAKA Afrose S, Hossain S, Salma U, Miah AG, Tsujii H. 2010. Dietary Karaya Saponin and Rhodobacter Capsulatus Exert Hypocholesterolemic Effects by Suppression of Hepatic Cholesterol Synthesis and Promotion of Bile Acid Synthesis in Laying Hens. Japan: Science and Technology Shinshu, University Japan. Agung V. 2008. Pengaruh pemberian ekstrak daun salam (eugenia polyantha) terhadap kadar HDL kolesterol serum tikus jantan galur wistar hiperlipidemia. Ariyanti R. 2007. Pengaruh pemberian infusa daun salam (eugenia polyantha wight) terhadap penurunan kadar asam urat darah mencit putih jantan yang diinduksi dengan potassium oksonat. Baraas F. 2003. Mencegah Serangan Jantung Dengan Menekan Kolesterol. Jakarta: Yayasan Kardia Iqratama. Dalimartha S. 2000. 36 Resep Tumbuhan Obat untuk Menurunkan Kolesterol. Jakarta: Penebar Swadaya. Do GM, Kwon EY, TaeYH, Kim HJ, Jeon SM, Lee MK. 2011. Tannin acid is more effective than clofibrate for elevation of hepatic β-oxidation and inhibition of 3-hydroxy-3- methyl-glutaryl-deficient mice. British Journal of Nutrition. Edeoga HO, Okwu DE, Mbaebie BO. 2005. Phytochemical Constituents Of some Nigeria
12 Medicinal Plants. Afr. J. Biotechnol. 4 (7): 685-688. Ekawati RA. 2007. Potensi antioksidasi daun salam (eugenia polyantha wight.) pada lingkungan agrobiofisik yang berbeda. Goodman & Gilman. 2007. Dasar Farmakologi Terapi. Penerjemah; Amalia Hanif et al. ed. 10. Jakarta: ECG. Guillaume R, Sonia P, Patrick C, Simone L, Benoit L, Charles C. 2006. Favourable Impact of Low Calori Cranberry Juice Consumtion on Plasma HDL- cholesterol Concentrations in Men. British Journal of Nutrition. Vol. 96 Harbone. JB. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Terbitan Kedua. Bandung : ITB Muhtadi. 2012. Potensis daun salam (syzygium polyanthum walp.) dan biji jinten hitam (nigella sativa linn) sebagai kandidat obat herbal terstandar asam urat. Murray RK, Granner DK, Mayes PA, Rodwell VW. 2003. Biokimia Harper. Edisi 25. Penerjemah : Hartono. Jakarta: ECG. Nelwan G., Wullur AC. Bodhi W. 2012. Pengaruh Jus Buah Apel Merah (Pyrus malus L.) Terhadap Kadar Kolesterol HDL Darah Tikus Putih Jantan Galur Wistar. Manado : FMIPA, UNSRAT Nidjvedt RJ et al. 2001. Flavonoid: a review a probable mechanisms of action and potential applications. American Journals Clinical Nutrition. USA. 74:418- 25. Nuratmi B. 1999. Khasiat daun salam (eugenia polyantha wight) sebagai antidiare pada tikus putih. Pidrayanti, Suhardjono. 2008. pengaruh pemberian ekstrak daun salam (eugenia polyantha) terhadap kadar LDL kolesterol serum tikus jantan galur wistar hiperlipidemia [Skripsi]. Semarang: Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro.
13 Prahastuti, S. 2011. Efek infusa daun salam (Syzygium plyanthum (Wight) Walp) terhadap penurunan kadar kolesterol total darah tikus model dislipidemia galur wistar [Jurnal Penelitian]. Bandung: Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Maranatha. Soemantri S, Budiarso LR, Sandjaja. 2005. Survei kesehatan nasional 2004 volume 3: sudut pandang masyarakat mengenai status, cakupan, ketanggapan, dan sistem pelayanan kesehatan [laporan penelitian]. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Studiawan H., Santosa M.H. 2005. Uji aktivitas peurun kadar glukosa darah ekstrak daun Eugenia polyantha pada mencit yang diinduksi aloksan. Surabaya: Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga Surabaya. Sudewo, B. 2005. Basmi Penyakit dengan Sirih Merah.Jakarta: PT. Agro Media Pustaka. Wilcox LJ, Borradaile NM, de Dreu LE, Huff MW. 2001. Secretion of hepatocyte apoB is inhibited y the flavonoids, naringenin and hesperetin, via reduced activity and expression of ACAT2 and MTP. J. Lipid Res 42:725-7

More Related Content

EFFECT OF COMBINATION EXTRACT OF BAY LEAVES AND NIACIN TO LOWERING LDL LEVELS AND RAISE HDL LEVELS IN WHITE MALE RATS

  • 1. 1 EFEK KOMBINASI EKSTRAK ETANOLIK DAUN SALAM (Eugenia polyantha Wight.) DAN NIASIN TERHADAP PENURUNAN KADAR LDL DAN PENINGKATAN KADAR HDL PADA TIKUS PUTIH JANTAN EFFECT OF COMBINATION EXTRACT OF BAY LEAVES AND NIACIN TO LOWERING LDL LEVELS AND RAISE HDL LEVELS IN WHITE MALE RATS Pradita Setyaningrum1, Lucia Vita Inandha Dewi1, Vivin Nopiyanti1 1Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi Jl. Letjen Sutoyo, Mojosongo, Surakarta 57127 Telp.0271-852518 Korespondensi : dhecassie@gmail.com / lucia.vita@yahoo.com INTISARI Aterosklerosis merupakan etiologi primer dari penyakit jantung koroner. Meningkatnya LDL dan menurunnya HDL menyebabkan keadaan hiperlipidemia. Daun salam mengandung flavonoid yang mempunyai aktivitas antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian kombinasi ekstrak etanolik daun salam (Eugenia polyantha Wight.) dan niasin terhadap penurunan LDL dan peningkatan HDL pada tikus putih jantan. Penelitian ini menggunakan 30 ekor tikus putih jantan yang dibagi menjadi 6 kelompok uji. Ekstrak daun salam diperoleh dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Kelompok I (CMC 0,5%), kelompok II (niasin), kelompok III (ekstrak daun salam 180 mg/g BB tikus), kelompok IV sebagai (ekstrak daun salam 90 mg/g BB tikus dan niasin 27 mg/g BB tikus), kelompok V sebagai (ekstrak daun salam 135 mg/g BB tikus dan niasin 13,5 mg/g BB tikus) dan kelompok VI (ekstrak daun salam 45 mg/g BB tikus dan niasin 40,5 mg/g BB tikus). Analisis data menggunakan uji Kolmogorof Smirnov, ANOVA satu arah kemudian dilanjutkan dengan Post Hoc Test. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dosis tunggal ekstrak salam, kombinasi I, kombinasi II dan kombinasi III dapat menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL yang bermakna (p<0,05). Dosis kombinasi ekstrak etanol daun salam 90mg/200g BB : niasin 27 mg/200g BB tikus (50:50) paling efektif menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL. Kata kunci : daun salam, niasin, LDL, HDL ABSTRACT Atherosclerosis is an etiology of Coronary Heart Disease (CHD). Increasing LDL and decreasing HDL cause a state of hyperlipidemia. Bay leaves contain
  • 2. 2 flavonoids as an antioxidant. This study aimed to determine influence combination of ethanolic extract of bay leaves and niacin on LDL and HDL levels in male rats and to determine the dose combination are most effective to decrease LDL levels and increase HDL levels. This study used 30 male rats were divided into 6 groups. Bay leaves extracts obtained by maceration using ethanol 70%. Group I (CMC 0,5 %), Group II (niacin), Group III (bay leaves extract 180 mg/g rats BW), Group IV (bay leaves extract 90 mg/g rats BW and niacin 27 mg/g rats BW), Group V (bay leaves extract 135 mg/g rats BW and niacin 13,5 mg/g rats BW), Group VI (bay leaves extract 45 mg/g rats BW and niacin 40,5 mg/g rats BW). Analyzed by Kolmogorof Smirnov test, one-way ANOVA followed by Post Hoc Test. The results showed that bay leaves extract, combination I, combination II, combination III can lower LDL levels and raise HDL levels were significantly (p < 0,05). Combination dose of ethanol extract of bay leaves 90 mg/g rats BW and niacin 27 mg/g BW (50:50) most effectively lower LDL levels and raise HDL levels. Keyword : bay leaves, niacin, LDL, HDL PENDAHULUAN Hiperlipidemia merupakan suatu keadaan meningkatnya kadar lipid darah yang ditandai dengan meningkatnya kadar trigliserida, LDL, dan kolesterol total dalam darah yang melebihi batas normal. Hiperlipidemia merupakan penyebab utama aterosklerosis dan aterosklerosis berkaitan dengan penyakit jantung koroner (PJK), serebrovaskular iskemia dan penyakit pembuluh perifer (Goodman & Gilman 2007). Proses aterosklerosis yang terjadi di pembuluh darah jantung dapat memicu terjadinya penyakit jantung koroner, dan apabila terjadi di pembuluh darah otak dapat menyebabkan stroke. Menurut hasil survei dari Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Departemen Kesehatan Republik Indonesia melalui Survei Kesehatan Rumah Tangga (SKRT), sejak tahun 1992 sampai survei terbaru tahun 2004, PJK masih menempati urutan pertama penyakit kronis yang diderita dan penyebab kematian di Indonesia (Soemantri et al. 2005). Pengelolaan hiperlipidemia sangat berguna untuk menghindari terjadinya aterosklerosis. Perkembangan aterosklerosis dapat dihambat apabila kadar kolesterol
  • 3. 3 dalam darah berhasil dikontrol dengan baik, yaitu dengan menurunkan kadar LDL plasma dan meningkatkan kadar HDL plasma (Baraas 2003). Merebaknya kecenderungan atau gaya hidup kembali ke alam (back to nature) semakin menambah keingintahuan masyarakat tentang masyarakat tentang khasiat tanaman obat (Sudewo 2005). Daun salam merupakan daun yang sering dipergunakan sebagai bumbu pada masakan karena baunya yang sedap. Daun salam selain digunakan sebagai bumbu masakan, bisa juga digunakan untuk mengobati berbagai macam penyakit, antara lain diare, kencing manis, menurunkan kadar kolesterol yang tinggi, menurunkan tekanan darah tinggi, sakit maag, kudis, gatal- gatal (Dalimartha 2000). Secara ilmiah daun salam dapat digunakan sebagai antidiare (Nuratmi 1999), untuk menurunkan glukosa darah (Studiawan & Santosa 2005), menurunkan asam urat (Ariyanti et al. 2007; Muhtadi et al. 2012), antioksidan (Ekawati 2007), menurunkan LDL (Pidrayanti 2008), dan menaikkan HDL (Agung 2008). Hasil penelitian sebelumnya mengungkapkan bahwa ekstrak air daun salam (Eugenia polyantha Wight.) dapat memberikan efek penurunan kadar kolesterol (Prahastuti 2011). Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui pengaruh dosis kombinasi ekstrak etanol daun salam (Eugenia polyantha Wight.) dan niasin terhadap penurunan kadar LDL dan kenaikan kadar HDL pada tikus putih jantan galur wistar dan mengetahui perbandingan dosis kombinasi yang paling efektif untuk menurunkan kadar LDL dan menaikkan kadar HDL dalam darah tikus putih jantan galur wistar. METODE PENELITIAN Alat, Bahan, dan Hewan Uji Alat. Botol maserasi, kain flanel, timbangan elektrik, beaker glass, vakum, oven, rotary evaporator, blender dan ayakan no.40. Alat untuk mengukur kadar kelembaban adalah moisture balance. Bahan. Daun salam, etanol 70%, aquadest, propiltiourasil, CMC 0,5%,
  • 4. 4 niasin, reagen kit kolesterol, reagen LDL dan HDL. Hewan uji. Tikus putih jantan galur wistar dengan umur ± 3-4 bulan dengan berat badan ±200 g. Jalannya Penelitian Pembuatan ekstrak etanol 70% daun salam Daun salam yang telah dikeringkan, dibuat serbuk kemudian diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 70 %. Hasil ekstraksi diuapkan dengan penangas air hingga didapat ekstrak kental. Identifikasi Kandungan Kimia Daun Salam Identifikasi flavonoid. Sampel diencerkan dengan sedikit air ditambah serbuk Mg alkohol-HCl (1:1) dan pelarut amil alkohol dikocok kuat agar memisah. Reaksi positif ditunjukkan adanya warna merah/kuning/jingga pada lapisan amil alkohol. Identifikasi saponin. Sampel dididihkan dengan air kemudian didinginkan lalu dikocok dan didiamkan beberapa menit. Terbentuknya busa yang stabil berarti positif terdapat saponin. Identifikasi tanin. Identifikasi dilakukan dengan cara sampel dididihkan dengan 20 ml air lalu disaring. Ditambahkan beberapa tetes feriklorida 1% dan terbentuknya warna coklat kehijauan atau biru kehitaman menunjukkan adanya tanin. Uji Efek Hiperlipidemia Dosis Propiltiourasil. Suspensi propiltiourasil dibuat dengan melarutkan 1 tablet yang mengandung 100 mg propiltiourasil ditambah suspensi CMC 0,5% sampai volume 1000 ml. Dosis CMC 0,5 %. Suspensi CMC 0,5% dibuat sebanyak 500 mg dalam 100 ml aquadest. Dosis niasin. Dosis niasin yang digunakan adalah 3000 mg pada 70 kg BB manusia (54 mg/200g BB tikus). Dosis ekstrak. Variasi dosis ekstrak etanol daun salam yang digunakan adalah 1 DE (180 mg/200 g bb), kombinasi ekstrak daun salam 90 mg : niasin 27 mg (50 :50), kombinasi ekstrak daun salam 135 mg : niasin 13,5 mg (75 : 25) dan kombinasi ekstrak daun salam 45 mg : niasin 40,5 mg (25 : 75). Ekstrak daun salam dan
  • 5. 5 niasin disuspensikan dengan CMC 0,5% dan aquadest sampai 100 ml. Pemeriksaan kadar LDL dan HDL 30 ekor hewan uji dibagi menjadi 6 kelompok. Sebelum digunakan untuk percobaan, tikus diadaptasikan terlebih dahulu selama 7 hari, lalu diambil darahnya untuk diperiksa kadar LDL dan HDLnya. Pengambilan darah dilakukan dengan cara memasukkan pipa kapiler di daerah vena mata tikus. Darah yang mengalir ditampung dalam tabung, kemudian sampel didiamkan 15 menit lalu disentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 3000 rpm. Tahap selanjutnya tikus diinduksi dengan propiltiourasil 0,01% dan 1 butir telur puyuh/tikus selama 14 hari, lalu diperiksa kadar LDL dan HDL pada tikus. Tahap terakhir yaitu masing-masing kelompok diber perlakuan selama 14 hari. Pembagian kelompok perlakuan sebagai berikut: Kelompok I : kontrol negatif Kelompok II : niasin Kelompok III : ekstrak daun salam 180 mg/200 g bb Kelompok IV : kombinasi dosis ekstrak daun salam 90 mg dan niasin 27 mg (50 : 50) Kelompok V : kombinasi dosis ekstrak daun salam 135 mg dan niasin 13,5 mg (75 : 25) Kelompok VI : kombinasi dosis ekstrak daun salam 45 mg dan niasin 40,5 mg (25 : 75) Setelah 14 diberi perlakuan tikus diambil darahnya untuk diperiksa kadar LDL dan HDL setelah perlakuan. Metode yang digunakan untuk pemeriksaan kadar LDL dan HDL dalam penelitian ini adalah metode CHOD-PAP, kemudian pengukuran kadar LDL dan HDL menggunakan alat fotometer stardust. Analisa Data Analisis data terlebih dahulu dilihat apakah data tersebut terdistribusi normal atau tidak menggunakan uji distribusi normal (Kolmogorov Smirnov). Jika data tidak terdistribusi normal (p < 0,05) dilanjutkan dengan metode uji non parametik, sedangkan jika data terdistribusi normal (p > 0,05) dilanjutkan dengan uji parametik
  • 6. 6 (ANOVA). Analisis dilanjutkan dengan Post Hoc Test untuk mengetahui perbedaan mean antara kelompok tersebut signifikan atau tidak dengan menggunakan program SPSS for windows Release 17. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN Hasil identifikasi kandungan kimia daun salam. Hasil identifikasi kandungan kimia daun salam menyatakan ekstrak mengandung flavonoid, saponin, dan tanin. Hasil rata-rata penurunan kadar LDL Hasil rata-rata kadar LDL pada hari ke-0, hari ke-14 dan hari ke-28 setelah pemberian perlakuan peroral dapat dilihat pada tabel 1. Tabel 1. Rata-rata kadar LDL tikus putih jantan pada setiap kelompok perlakuan Kelompok Rata-rata LDL (mg/dL) Kenaikan (mg/dL) Penurunan (mg/dL) T0 T14 T28 Δ T14-T0 Δ T14-T28 I 46,2 131.4 124.8 85,4 6,6 II 44,4 128.4 67 84 61,4 III 43,2 132.4 83.2 89,2 49,2 IV 46 132 73.8 86 58,2 V 42,8 129.2 88.2 86,4 41 VI 46,6 135.4 93.4 88,8 42 Keterangan : Kelompok I : kontrol negatif Kelompok II : dosis tunggal niasin 54mg/200g BB tikus Kelompok III : dosis tunggal ekstrak daun salam180 mg/200g BB tikus Kelompok VI : dosis kombinasi I, daun salam 90 mg/200g BB tikus : niasin 27 mg/200g BB tikus (50 : 50) Kelompok V : dosis kombinasi II, daun salam 135 mg/200g BB tikus : niasin 13,5 mg/200g BB tikus (75 : 25) Kelompok VI : dosis kombinasi III, daun salam 45 mg/200g BB tikus : niasin 40,5 mg/200g BB tikus (25 : 75)
  • 7. 7 Gambar 1. Rata-rata kadar LDL serum tikus putih (mg/dL) Berdasarkan tabel di atas hasil dari analisis statistik menggunakan uji Kolmogorov Smirnov penurunan kadar LDL terdistribusi normal (p> 0,05). Varian data sama (p>0,05) dilanjutkan uji One-Way ANOVA dan uji Tukey HSD. Berdasarkan hasil uji Tukey HSD kelompok kontrol negatif berbeda nyata dengan semua kelompok perlakuan. Pada kelompok II niasin tidak memiliki perbedaan yang nyata dengan kelompok III, IV, V dan VI. Dosis ekstrak daun salam 90 mg : niasin 27 mg (50 : 50) dianggap efektif karena merupakan dosis yang paling berpengaruh terhadap penurunan LDL dengan rata-rata penurunan kadar LDL lebih besar dari dosis tunggal, kombinasi ekstrak daun salam 135 mg : niasin 13,5 mg (75 : 25) dan kombinasi ekstrak daun salam 45 mg : niasin 40,5 mg (25 : 75). Niasin dan ekstrak menurunkan kadar LDL dengan mekanisme yang berbeda. Niasin mengurangi kadar kolesterol dengan cara melibatkan penghambatan sekresi VLDL, yang selanjutnya menurunkan produksi LDL. Menurut Nidjveldt (2001) flavonoid merupakan antioksidan karena dapat menangkap radikal bebas dengan membebaskan atom hidrogen dari gugus hidroksilnya, dikatakan juga bahwa flavonoid dapat menghalangi reaksi oksidasi LDL dalam tubuh. Kerusakan endotelium 0 50 100 150 I II III IV V VI kadarrata-rataLDL(mg/dL) kelompok perlakuan Histogram PenurunanLDL T0 T14 T28
  • 8. 8 yang disebabkan keadaan hiperlipidemia ini memicu reaksi oksidasi yang dapat dihambat oleh preparat antioksidan seperti flavonoid, dalam dosis kecil flavonoid telah mampu melebarkan pembuluh darah, juga menurunkan tingkat oksidasi LDL (Suharti 2009). Flavonoid diketahui meningkatkan reseptor LDL sebanyak lima kali dan meningkatkan kemampuan LDL untuk terikat pada reseptor sebesarnya dua kali (Wilcox et al. 2001). Kandungan saponin dalam ekstrak daun salam memiliki mekanisme hipolipidemia melalui penurunan sintesis kolesterol dengan menghambat aktivitas HMG-CoA reductase dan peningkatan ekskresi asam empedu akibat meningkatnya konversi kolesterol menjadi asam empedu, saponin juga mampu mengubah absorbsi kolesterol dan asam empedu dengan menginterupsi formasi misel, sehingga kolesterol tidak dapat diabsorbsi. Disisi lain, saponin berperan dalam meningkatkan pergantian atau pengelupasan sel usus melalui tindakan membranolytic sehingga meningkatkan hilangnya kolesterol di membran sel ke dalam sel yang terkelupas (Afrose et al. 2010). Mekanisme hipolipidemia ekstrak daun salam juga didukung juga oleh zat fitokimia tanin. Tanin dapat menghambat enzim HMG-CoA reductase yang berperan mensintesis kolesterol dan enzim ACAT yang bertanggung jawa dalam esterifikasi kolesterol. Terhambatnya aktivitas HMG-CoA reductase akan menurunkan sintesis kolesterol di hati sehingga menurunkan sintesis Apo B- 100 dan meningkatkan reseptor LDL pada permukaan hati. Dengan demikian, kolesterol LDL darah akan ditarik ke hati sehingga menurunkan LDL dan VLDL (Do et al. 2011). Hasil rata-rata peningkatan kadar HDL Hasil rata-rata kadar HDL pada hari ke-0, hari ke-14 dan hari ke-28 setelah pemberian perlakuan peroral dapat dilihat pada tabel 2.
  • 9. 9 Tabel 2. Rata-rata kadar HDL tikus putih jantan pada setiap kelompok perlakuan Kelompok Rata-rata HDL (mg/dL) Penurunan (mg/dL) Kenaikan (mg/dL) T0 T14 T28 Δ T0-T14 Δ T28-T14 I 69,2 32,4 39,6 36,8 7,2 II 71,8 35,4 69,8 36,4 34,4 III 67,4 35,6 58,2 31,8 22,6 IV 67,6 33 63 34,6 30 V 68,8 33,6 55,6 35,2 22 VI 70,6 34,6 51 36 16,4 Keterangan : Kelompok I : kontrol negatif Kelompok II : dosis tunggal niasin 54mg/200g BB tikus Kelompok III : dosis tunggal ekstrak daun salam180 mg/200g BB tikus Kelompok VI : dosis kombinasi I, daun salam 90 mg/200g BB tikus : niasin 27 mg/200g BB tikus (50 : 50) Kelompok V : dosis kombinasi II, daun salam 135 mg/200g BB tikus : niasin 13,5 mg/200g BB tikus (75 : 25) Kelompok VI : dosis kombinasi III, daun salam 45 mg/200g BB tikus : niasin 40,5 mg/200g BB tikus (25 : 75) Gambar 2. Rata-rata kadar HDL serum tikus putih (mg/dL) 0 20 40 60 80 I II III IV VI VI kadarrata-rataHDL(mg/dL) kelompok perlakuan Histogram PeningkatanHDL T0 T14 T28
  • 10. 10 Berdasarkan tabel di atas hasil dari analisis statistik menggunakan uji Kolmogorov Smirnov peningkatan kadar HDL terdistribusi normal (p> 0,05). Varian data sama (p>0,05) dilanjutkan uji One-Way ANOVA dan uji Tukey HSD. Berdasarkan hasil uji Tukey HSD kelompok kontrol negatif berbeda nyata dengan kelompok II dan IV. Pada kelompok II niasin tidak memiliki perbedaan yang nyata dengan kelompok III, IV, dan V. Dosis ekstrak daun salam 90 mg : niasin 27 mg (50 : 50) dianggap efektif karena merupakan dosis yang paling berpengaruh terhadap kenaikan HDL dengan rata- rata kenaikan kadar HDL lebih besar dari ekstrak daun salam 180 mg, kombinasi ekstrak daun salam 135 mg : niasin 13,5 mg (75 : 25) dan kombinasi ekstrak daun salam 45 mg : niasin 40,5 mg (25 : 75). Niasin dan ekstrak dapat meningkatkan HDL dengan mekanisme yang berbeda. Niasin yang dapat meningkatkan kadar kolesterol HDL karena mampu menurunkan katabolisme Apo A-1 yang merupakan penyusun utama HDL (Nelwan 2012). Ekstrak daun salam mengandung flavonoid yang diduga dapat meningkatkan kadar HDL dengan cara meningkatkan produksi Apo A1 (Guillaume et al. 2001). Apo A1 bertugas sebagai kofaktor enzim untuk LCAT serta sebagai ligand untuk interaksi dengan reseptor lipoprotein dalam jaringan pada HDL. Dengan adanya peningkatan Apo A1 diharapkan dapat meningkatkan kadar koletserol HDL. HDL yang mengandung Apo A1 bersifat protektif terhadap aterosklerosis (Murray et al. 2003). Kesimpulan Pertama, pemberian kombinasi ekstrak etanol 70% daun salam dan niasin dapat menurunkan kadar LDL pada tikus putih jantan dan meningkatkan kadar HDL pada tikus putih jantan. Kedua, dosis kombinasi ekstrak etanolik daun salam 90 mg/g BB : niasin 27 mg/g BB (50:50) paling efektif menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL pada tikus
  • 11. 11 putih jantan yang ditunjukkan dengan penurunan dan kenaikan yang lebih besar dibandingkan dengan dosis lain. Saran Pertama, perlu penelitian efek jangka panjang pemberian kombinasi ekstrak daun salam dan niasin terhadap penurunan kadar kolesterol LDL dan peningkatan kadar kolesterol HDL. Kedua, perlu dilakukan penelitian profil kinetika kadar niasin dalam darah setelah pemberian ekstrak daun salam. DAFTAR PUSTAKA Afrose S, Hossain S, Salma U, Miah AG, Tsujii H. 2010. Dietary Karaya Saponin and Rhodobacter Capsulatus Exert Hypocholesterolemic Effects by Suppression of Hepatic Cholesterol Synthesis and Promotion of Bile Acid Synthesis in Laying Hens. Japan: Science and Technology Shinshu, University Japan. Agung V. 2008. Pengaruh pemberian ekstrak daun salam (eugenia polyantha) terhadap kadar HDL kolesterol serum tikus jantan galur wistar hiperlipidemia. Ariyanti R. 2007. Pengaruh pemberian infusa daun salam (eugenia polyantha wight) terhadap penurunan kadar asam urat darah mencit putih jantan yang diinduksi dengan potassium oksonat. Baraas F. 2003. Mencegah Serangan Jantung Dengan Menekan Kolesterol. Jakarta: Yayasan Kardia Iqratama. Dalimartha S. 2000. 36 Resep Tumbuhan Obat untuk Menurunkan Kolesterol. Jakarta: Penebar Swadaya. Do GM, Kwon EY, TaeYH, Kim HJ, Jeon SM, Lee MK. 2011. Tannin acid is more effective than clofibrate for elevation of hepatic β-oxidation and inhibition of 3-hydroxy-3- methyl-glutaryl-deficient mice. British Journal of Nutrition. Edeoga HO, Okwu DE, Mbaebie BO. 2005. Phytochemical Constituents Of some Nigeria
  • 12. 12 Medicinal Plants. Afr. J. Biotechnol. 4 (7): 685-688. Ekawati RA. 2007. Potensi antioksidasi daun salam (eugenia polyantha wight.) pada lingkungan agrobiofisik yang berbeda. Goodman & Gilman. 2007. Dasar Farmakologi Terapi. Penerjemah; Amalia Hanif et al. ed. 10. Jakarta: ECG. Guillaume R, Sonia P, Patrick C, Simone L, Benoit L, Charles C. 2006. Favourable Impact of Low Calori Cranberry Juice Consumtion on Plasma HDL- cholesterol Concentrations in Men. British Journal of Nutrition. Vol. 96 Harbone. JB. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Terbitan Kedua. Bandung : ITB Muhtadi. 2012. Potensis daun salam (syzygium polyanthum walp.) dan biji jinten hitam (nigella sativa linn) sebagai kandidat obat herbal terstandar asam urat. Murray RK, Granner DK, Mayes PA, Rodwell VW. 2003. Biokimia Harper. Edisi 25. Penerjemah : Hartono. Jakarta: ECG. Nelwan G., Wullur AC. Bodhi W. 2012. Pengaruh Jus Buah Apel Merah (Pyrus malus L.) Terhadap Kadar Kolesterol HDL Darah Tikus Putih Jantan Galur Wistar. Manado : FMIPA, UNSRAT Nidjvedt RJ et al. 2001. Flavonoid: a review a probable mechanisms of action and potential applications. American Journals Clinical Nutrition. USA. 74:418- 25. Nuratmi B. 1999. Khasiat daun salam (eugenia polyantha wight) sebagai antidiare pada tikus putih. Pidrayanti, Suhardjono. 2008. pengaruh pemberian ekstrak daun salam (eugenia polyantha) terhadap kadar LDL kolesterol serum tikus jantan galur wistar hiperlipidemia [Skripsi]. Semarang: Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro.
  • 13. 13 Prahastuti, S. 2011. Efek infusa daun salam (Syzygium plyanthum (Wight) Walp) terhadap penurunan kadar kolesterol total darah tikus model dislipidemia galur wistar [Jurnal Penelitian]. Bandung: Fakultas Kedokteran, Universitas Kristen Maranatha. Soemantri S, Budiarso LR, Sandjaja. 2005. Survei kesehatan nasional 2004 volume 3: sudut pandang masyarakat mengenai status, cakupan, ketanggapan, dan sistem pelayanan kesehatan [laporan penelitian]. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Studiawan H., Santosa M.H. 2005. Uji aktivitas peurun kadar glukosa darah ekstrak daun Eugenia polyantha pada mencit yang diinduksi aloksan. Surabaya: Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga Surabaya. Sudewo, B. 2005. Basmi Penyakit dengan Sirih Merah.Jakarta: PT. Agro Media Pustaka. Wilcox LJ, Borradaile NM, de Dreu LE, Huff MW. 2001. Secretion of hepatocyte apoB is inhibited y the flavonoids, naringenin and hesperetin, via reduced activity and expression of ACAT2 and MTP. J. Lipid Res 42:725-7