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杨惟珶
- 1. 从鸡蛋分离蛋清萃取蛋白质 做檢測及各種定量法 長榮大學生物科技學系100學年專題實習成果 實習單位:長榮大學生物科技系 指導老師:田宥恩老師 實習學生：杨惟珶 實習內容 兩個月說長不長，一瞬間就結束了，卻令我難忘。 實驗室的工作安全是每位實驗人員進入實驗室的時候必頇熟悉的，一開始先熟悉實驗室的大環境清 楚了解實驗室每一項儀器的操作與維護，前半個月每天都有儀器維護檢查的例行工作與跟著老師做 小實驗；儀器檢查讓我接觸到平常上課沒摸過的儀器，因此感覺很新鮮；小實驗雖小又簡單，但實 驗精神卻不容小覷，有細菌革蘭氏染色實驗、配製各種培養基，了解到各種養菌的小方法與多樣的 細菌生態，並跟著老師進行許多測試(如：落菌實驗、種青黴菌、黴菌與觀察細菌代謝生長…等等) 及學習使用生物技術相關電腦軟體；後半個月除了每天例行維護檢查工作外，正式進入我的實驗主 題蛋白質檢測，先從原本的一顆雞蛋取出蛋白蛋清，製備成蛋白質溶液、蛋白質氯化鈉溶液，利用 蛋白質鹽析反應得到球蛋白與白蛋白，進一步將蛋白質以SDS-PAGE電泳跑膠，來測定我們的蛋白質 分子量得結果↓ 蛋白質檢測尚有許多種定量法來為蛋白質定量，在眾多種 定量法裡，這次實習做了三種定量法實驗： Bradford Test、Lowry Test、Biuret Test 在做定量實驗前，必頇先製備好所需蛋白質濃度與所加入 的標準液，因此一步一步的序列稀釋，了解不同試劑對蛋 白質濃度不同及吸收光的波長也不同，徹底對蛋白質濃度 與試劑特性互相做結合，蛋白質透過試劑呈色對光的靈敏 度高低變化來得知我們的蛋白質濃度，進而求出的公式值 與R?值，並可從此公式推算出未知的蛋白質濃度。 以下為定量實驗的數據結果： 此為Bradford Test 結果↓ (縱列為測出OD值、行列為濃度)此為Biuret Test結果↓ 沒有Lowry Test 的結果，因為數 據最後為不準確 值，原本應當沒 有蛋白質濃度的 96孔位置測出有 蛋白質反應，又 做了許多探討， 因此無法得到公 式值也無法有圖 呈現在結果上。 實習心得與感謝 這次的實習，很感謝學校與系上老師的用心，不放棄任何一隻羊，為每位學生因材施教，使我能夠 順利在兩個月內完成實習進度，雖然在校的課程許多教學都很精闢，但在大環境跟著同學一起做實 驗和真正自己單獨和老師做卻有不同的領悟，也許那是沒修過專題的我與實習安排對實驗室充滿了 許多理想，兩個月的實習轉眼間就結束了，真的在不知不覺間發現短短兩個月卻有平常上課不一樣 的收穫，保持學習的心做每一項工作，即使是每天的例行工作也會有不同的發現，及使是學到的東 西，也未必能夠馬上完全吸收，但如果努力持續下去，美好的果實一定會手到擒來，希望此次的經 驗能夠分享給每一位。