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Huntington's disease test
                    亨汀頓氏舞蹈症檢測
               長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習
                  實習單位:成功大學生理研究所
                     指導教授:楊尚訓
                      學生:江书纬
 Abstract
 在人類身上存在的許多遺傳性疾病,這些遺傳性疾病有的以單條染色體引發病症,有的
則是需要搭配多條染色體才會引發疾病,而有些卻是DNA複製時產生的疾病,而
Huntington's disease是在第4對染色體上產生重複序列有CAG序列連續重複超過35次就有
可能會發病,而隨著重複次數越多發病年齡就越低,多數發病再40~50歲,發病後會有手
腳不受控制的動作,智力能力會開始下降,性格上會產生變化,也有少數在20歲以前就會
發病,通常是序列重複非常多次,最後會漸漸失去運動能力,吞嚥或呼吸困難等等,最後
死於呼吸感染或營養不良等等。在這次實驗中藉由各種chage gene mice擁有不同長度之
CAG序列,利用從mice身上取得的腦、心、肝、脾、肺、腎、肌肉,從這些組織上去得蛋
白質,再利用SDS-PAGE將不同大小之蛋白質分離,再以western blot將蛋白質轉漬到
membrane上,以抗體接合來檢驗不同長度之CAG序列對於蛋白質的生成影響程度。
Method




Results




                                             Negative
Negative
Negative




                             Negative




                                             Positive
Positive




                                              Muscle
Positive




                             Positive




                                              Kidney
                                              Spleen
 Muscle
 Muscle




                              Muscle
 Kidney
 Kidney




                              Kidney
 Spleen
 Spleen




                              Spleen




                                               Lung
                                               Liver
                                               Brain
                               Liver
  Lung
  Heart
  Brain




                                                Heart
  Lung
  Heart




                               Lung
  Brain




                               Heart
                               Brain
  Liver
  Liver




 圖一、心臟、肺臟、     圖二、上端無明顯band 圖三、所有組織上端皆       圖四、肺臟與雞肉上端
 腎臟上端有少量band   下端腦部只有少量表現     有明顯band          有很少量band
Discussion
 在結果中下端是抗體的表現位置,而在positive中可以得知如果疾病症狀越是強烈時上
端(上膠處)會有明顯的band,因此可以比較出圖三具有最強烈的疾病症狀,其次為圖一,
在其次為圖四,而圖二是最不具有疾病症狀。
誌謝
 非常感謝成功大學生理研究所楊尚訓教授與實驗室中學長姐們的指導與幫助,語學校老
們的幫助,才能夠也這次機會學習到許多與過去以往不同的經驗,並學習到更多的實驗操
作與技巧。
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江书纬

  • 1. Huntington's disease test 亨汀頓氏舞蹈症檢測 長榮大學生物科技學系-100學年度專題實習 實習單位:成功大學生理研究所 指導教授:楊尚訓 學生:江书纬 Abstract 在人類身上存在的許多遺傳性疾病,這些遺傳性疾病有的以單條染色體引發病症,有的 則是需要搭配多條染色體才會引發疾病,而有些卻是DNA複製時產生的疾病,而 Huntington's disease是在第4對染色體上產生重複序列有CAG序列連續重複超過35次就有 可能會發病,而隨著重複次數越多發病年齡就越低,多數發病再40~50歲,發病後會有手 腳不受控制的動作,智力能力會開始下降,性格上會產生變化,也有少數在20歲以前就會 發病,通常是序列重複非常多次,最後會漸漸失去運動能力,吞嚥或呼吸困難等等,最後 死於呼吸感染或營養不良等等。在這次實驗中藉由各種chage gene mice擁有不同長度之 CAG序列,利用從mice身上取得的腦、心、肝、脾、肺、腎、肌肉,從這些組織上去得蛋 白質,再利用SDS-PAGE將不同大小之蛋白質分離,再以western blot將蛋白質轉漬到 membrane上,以抗體接合來檢驗不同長度之CAG序列對於蛋白質的生成影響程度。 Method Results Negative Negative Negative Negative Positive Positive Muscle Positive Positive Kidney Spleen Muscle Muscle Muscle Kidney Kidney Kidney Spleen Spleen Spleen Lung Liver Brain Liver Lung Heart Brain Heart Lung Heart Lung Brain Heart Brain Liver Liver 圖一、心臟、肺臟、 圖二、上端無明顯band 圖三、所有組織上端皆 圖四、肺臟與雞肉上端 腎臟上端有少量band 下端腦部只有少量表現 有明顯band 有很少量band Discussion 在結果中下端是抗體的表現位置,而在positive中可以得知如果疾病症狀越是強烈時上 端(上膠處)會有明顯的band,因此可以比較出圖三具有最強烈的疾病症狀,其次為圖一, 在其次為圖四,而圖二是最不具有疾病症狀。 誌謝 非常感謝成功大學生理研究所楊尚訓教授與實驗室中學長姐們的指導與幫助,語學校老 們的幫助,才能夠也這次機會學習到許多與過去以往不同的經驗,並學習到更多的實驗操 作與技巧。